Attempt to produce a nile tilapia tetraploid line by heat shock induction

Abstract

A tilápia do Nilo pode atingir a maturidade sexual antes de atingir o tamanho do mercado, o que pode ser um grande problema para as fazendas de produção. Para contornar este problema, a solução padrão é usar o tratamento androgênico para produzir apenas peixes machos. No entanto, o uso de hormônios tem problemas ambientais indesejáveis ​​devido aos resíduos na água. Uma alternativa seria produzir peixes triplóides estéreis, o que é conceitualmente possível pelo acasalamento tetraplóide x diplóide. Portanto, nosso objetivo foi desenvolver um plantel tetraplóide de tilápia do Nilo. Realizamos três experimentos, onde as fêmeas foram induzidas hormonalmente à desova, os oócitos foram coletados, fertilizados com um pool de sêmen e os ovos foram incubados a 27 °C. No experimento I (E-I), determinamos o primeiro intervalo de clivagem (FCI) para estabelecer um momento adequado para choque térmico. Utilizando o FCI obtido de 90 min, desenhamos o Experimento II (E-II) com nove tratamentos: controle (sem choque); um choque (40°C) aos 60 min pós-fertilização de 1, 2, 3 ou 4 min de duração; e dois choques (40°C) a 50 e 70 min pós-fertilização de 1, 2, 3 ou 4 min. O estado de ploidia dos juvenis foi avaliado por citometria de fluxo, porém, não foi encontrado tetraploide, assim, utilizando os resultados de E-II, um terceiro experimento foi idealizado. No Experimento III (E-III), foram aplicados nove tratamentos: controle (sem choque); um choque (40°C) a 75, 80, 85 ou 90 min pós-fertilização; ou dois choques (40°C) a 75 e 85 min, 80 e 90 min, 85 e 95 min ou 90 e 100 min pós-fertilização, todos os choques foram de 4 min. Tilápias triploides, mosaicos e aneuploides foram identificadas nos grupos tratados. Apesar de termos analisado um grande número de animais (>2800) que foram submetidos a diferentes choques térmicos aplicados em janelas adequadas de indução tetraplóide, nenhum juvenil 100% 4 N foi encontrado, indicando que a geração de reprodutores tetraplóides de tilápia do Nilo usando os protocolos descritos é impraticável.