A utilização de Saccharomyces cerevisiae para a caracterização funcional da proteína SmRho1 de Schistoma mansoni

Francisco Pereira Lobo

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DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor1	Gloria Regina Franco	pt_BR
dc.contributor.referee1	Jose Miguel Ortega	pt_BR
dc.contributor.referee2	Elida Mara Leite Rabelo	pt_BR
dc.creator	Francisco Pereira Lobo	pt_BR
dc.date.accessioned	2019-08-14T06:58:06Z	-
dc.date.available	2019-08-14T06:58:06Z	-
dc.date.issued	2005-02-25	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/1843/UCSD-87RHQP	-
dc.description.resumo	A esquistossomose é atualmente a segunda doença tropical mais prevalente na espécie humana, sendo causada por parasitas do gênero Schistosoma. Nas Américas, o maior agente etiológico dessa patologia é o Schistosoma mansoni. Dada a grande importância médica desse parasita, diversos projetos Genoma tem sido realizados visando conhecer a biologia do mesmo e solucionar algumas dúvidas sobre diversos aspectos da sua relação com o hospedeiro vertebrado.Em um desses projetos um cDNA homólogo à GTPase de baixo peso molecular Rho, que participa de diversos eventos de polarização celular em todos os eucariotos, foi isolado e caracterizado por complementação funcional em leveduras. Nessa caracterização foi verificado que o mesmo apresentava uma complementação muito mais abrangente do que o seu homólogo humano, sendo inclusive capaz de complementar a levedura em condições restritivas de estresse osmótico. Através da comparação das seqüências do gene de S. mansoni com seu homólogo de Saccharomyces cerevisiae e com HsRhoA humana 3 seqüências de SmRho1 mutantes (E97P, L101T e E97P/L101T) foram construídas com mutações nas posições mais discrepantes entre HsRhoA e as outras duas Rho, visando elucidar mais sobre o mecanismo de complementação de SmRho1. Dois dos mutantes construídos (E97P, e E97P/L101T) apresentaram uma complementação parcial comparável à HsRhoA, indicando assim que possivelmente o resíduo de ácido glutâmico 97 é crítico para a complementação diferencial entre SmRho1 e HsRhoA.Neste trabalho a caracterização de SmRho1 e seus mutantes continuou através da verificação de ensaios de complementação funcional com as Rho supracitadas na presença de cafeína, que é um inibidor da via de PKC, da qual ScRho1 participa e através da procura de possíveis interações diferenciais entre SmRho1 e seus mutantes, ScRho1 e HsRhoA com domínios de proteínas que sabidamente interagem com ScRho1 em S. cerevisiae pela técnica do duplo híbrido.Os ensaios de complementação demonstram que SmRho1 é bem menos eficiente que seu homólogo de levedura na presença de PKC e sugerem que os mutantes E97P e E97P/L101T possuem ainda mais restrições do que seu selvagem na complementação. Os ensaios de duplo-híbrido não foram capazes de detectar nenhuma interação, possivelmente por termos trabalhado com domínios ao invés das ORFs completas.	pt_BR
dc.language	Português	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal de Minas Gerais	pt_BR
dc.publisher.initials	UFMG	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	Imunologia	pt_BR
dc.subject	Bioquímica	pt_BR
dc.subject.other	Bioquímica	pt_BR
dc.subject.other	Saccharomyces cerevisiae	pt_BR
dc.subject.other	Esquistossomose mansônica	pt_BR
dc.title	A utilização de Saccharomyces cerevisiae para a caracterização funcional da proteína SmRho1 de Schistoma mansoni	pt_BR
dc.type	Dissertação de Mestrado	pt_BR
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