Lipopolysaccharide exposure modulates the contractile and migratory phenotypes of vascular smooth muscle cells

Abstract

Introdução Os sobreviventes de sepse estão em maior risco de eventos cardiovasculares. O lipopolissacarídeo (LPS) ativa o receptor Toll-like 4 (TLR4) na sepse. A ativação do TLR4 modula o fenótipo das células musculares lisas vasculares (VSMCs) e contribui para as alterações cardiovasculares após a sepse.

Mirar Investigar alterações no fenótipo de VSMCs causadas pela ativação de TLR4 induzida por LPS.

Métodos As VSMCs de rato foram incubadas com LPS. Duas condições de incubação foram usadas nos ensaios de contração e migração celular: estimulação aguda — o estímulo LPS foi iniciado no início do ensaio e mantido durante todo o ensaio; e pré-condicionamento — a estimulação com LPS foi aplicada antes do ensaio e então descontinuada. Foram avaliadas a produção de óxido nítrico (NO), a expressão de mRNA de citocinas e marcadores fenótipos e a produção de interleucina (IL)-6.

Principais conclusões O LPS aumentou a expressão gênica de IL-1β, IL-6, TNFα e MCP-1 (p < 0,001), de marcadores fenótipos secretores colágeno e vimentina (p < 0,0479) e do marcador contrátil músculo liso 22α (SM22α) ( p = 0,0067). A exposição ao LPS aumentou a secreção de IL-6 após 24 e 48 h (p < 0,0001), e NO em 8 e 24 h (p < 0,0249) via sintase de óxido nítrico induzível (iNOS), como demonstrado por uma diminuição no NO após a incubação com aminoguanidina. A estimulação aguda com LPS reduziu a migração e a contração de maneira NO-dependente, enquanto o pré-condicionamento com LPS aumentou ambas de maneira IL-6-dependente.

Significado O LPS afeta as VSMCs modulando seus fenótipos secretores, contráteis e migratórios. A estimulação aguda de VSMCs com LPS promoveu redução dependente de NO na migração e contração, enquanto o pré-condicionamento com LPS promoveu aumentos na migração e contração dependentes de IL-6, evidenciando que as VSMCs podem apresentar modificações fenotípicas que persistem após a sepse, contribuindo assim para eventos cardiovasculares pós-sepse .