A rapid diagnostic test for human visceral leishmaniasis using novel leishmania antigens in a laser direct-write lateral flow device

Abstract

A leishmaniose visceral (LV) causa alta morbidade e mortalidade em países de baixa a média renda em todo o mundo. Neste estudo, usamos a tecnologia Laser Direct-Write (LDW) para desenvolver um novo Dispositivo de Fluxo Lateral (LFD) com geometria de canal duplo em uma plataforma de papel de baixo custo como um ensaio sorodiagnóstico rápido e preciso para LV humana. Este Duplex VL-LFD foi baseado em um dispositivo microfluídico com padrão de laser usando duas proteínas recombinantes de Leishmania, β-tubulina e LiHyp1, como novos antígenos de diagnóstico. O ensaio VL-LFD foi testado com amostras de sangue/soro de pacientes diagnosticados com LV, leishmaniose tegumentar, leishmaniose de identidade desconhecida, outras doenças parasitárias com sintomas clínicos semelhantes, ou seja, hanseníase e doença de Chagas, e sangue de doadores saudáveis, e comparado em em paralelo com o kit comercial rK39 IT-LEISH®. O diagnóstico clínico e o ensaio de Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real foram usados ​​como padrões de referência. Sensibilidade VL-LFD (S ± 95% Intervalos de Confiança (IC)) de 90,9 (78,9-100) e Especificidade (Sp ± 95% CI) de 98,7 (96,1-100) superaram o Kit IT-LEISH® [S= 77,3 ( 59,8-94,8), Sp = 94,7 (89,6-99,8)]. Este é o primeiro estudo relatando o desenvolvimento bem-sucedido de um ensaio LFD usando a tecnologia LDW e o VL-LFD garante testes comparativos em grupos maiores de pacientes e em áreas com LV endêmica para melhorar o diagnóstico e o manejo da doença.