1. Repositório Institucional da UFMG
  2. Trabalhos Acadêmicos
  3. Dissertações e Teses
  4. Pós-Graduação em Medicina Molecular
  5. Dissertações de Mestrado
Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/1843/32461
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dc.contributor.advisor1Frederico Duarte Garciapt_BR
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/2658762200370578pt_BR
dc.contributor.advisor-co1Sordaini Maria Caligiornept_BR
dc.creatorRaíssa Lima Gonçalves Pereirapt_BR
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/4844975534047392pt_BR
dc.date.accessioned2020-02-12T12:48:49Z-
dc.date.available2020-02-12T12:48:49Z-
dc.date.issued2019-07-24-
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/1843/32461-
dc.description.resumoAtualmente, o consumo de drogas ilícitas no Brasil tornou-se um problema de saúde pública. A imunofarmacoterapia é a estratégia mais promissora para o tratamento da dependência à cocaína e ao crack. O grupo de pesquisa NAVeS, em parceria com o Departamento de Química da UFMG, desenvolveu a molécula UFMG-VAC4N2, que se mostrou eficaz na produção de anticorpos anticocaína em camundongos. Esses anticorpos específicos reduzem a fração livre da droga na corrente sanguínea, moderando seus efeitos e reduzindo sua entrada na barreira hematoencefálica (BHE) e, consequentemente, no sistema nervoso central (SNC). Diante disto, é importante determinar-se a quantificação desses anticorpos específicos produzidos pela indução da vacina anticocaína. No presente estudo, utilizamos um Ensaio Imunoenzimático (ELISA), método analítico qualitativo/quantitativo que tem como princípio a reação de um antígeno-anticorpo (Ac-Ag) obtida por meio de um conjugado e substrato enzimático que permitem a mudança de coloração do meio e quantificação por espectrofotometria. Foram analisadas duas estratégias distintas de identificação e quantificação desses anticorpos tipo IgG em camundongos, as quais são: 1) uso do GNE, um hapteno de cocaína, conjugado à albumina sérica bovina (BSA) e fixado em base sólida e; 2) uso de cocaína livre em fase sólida. O método consistiu na imunização com a vacina de hapteno GNE conjugada à proteína KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin), de atividade imunológica já estabelecida, em camundongos Balb/c machos e dosagem dos anticorpos anticocaína pelo método ELISA indireto e competitivo. Foram realizadas 3 imunizações nos tempos 0, 7 e 21 dias, sendo que cada animal recebeu, por imunização, 300 µL de emulsão contendo GNE-KLH disperso em adjuvante de Freund completo ou incompleto. Em cada imunização foi feita coleta de cerca de 400 µL de sangue dos animais pela via submandibular para separação do soro e realização dos ensaios imunológicos. Um pool de soros dos animais com densidade óptica maior a 0,7 foi produzido para os testes de linearidade e para identificar a técnica mais sensível de detecção dos anticorpos específicos para cocaína. No teste de linearidade para dosagem desses anticorpos foi encontrada uma resposta relativamente positiva nas duas técnicas, porém a resposta para GNE-BSA foi mais satisfatória. Conclui-se que, para dosagem de anticorpos anticocaína do tipo IgG em camundongos, as duas técnicas são confiáveis, contudo, os resultados para GNE-BSA permitem maior sensibilidade para detecção desses anticorpos. As perspectivas para esse trabalho são a padronização do método ELISA para a detecção de anticorpos anticocaína em humanos, visando o estudo clínico de fase 1 para a vacina UFMG-VAC4N2 e o estudo dos subtipos de anticorpos IgG produzidos pela vacina, relevante para a compreensão dos mecanismos pelos quais esses anticorpos podem reduzir o consumo de droga e para avaliar a seleção dos pacientes para receberem um futuro tratamento imunológico.pt_BR
dc.description.sponsorshipCAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superiorpt_BR
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Minas Geraispt_BR
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.departmentMEDICINA - FACULDADE DE MEDICINApt_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Medicina Molecularpt_BR
dc.publisher.initialsUFMGpt_BR
dc.rightsAcesso Abertopt_BR
dc.subjectELISApt_BR
dc.subjectAnticorpo anticocaínapt_BR
dc.subjectVacina anticocaínapt_BR
dc.subjectDependência químicapt_BR
dc.subject.otherEnsaio de Imunoadsorção Enzimáticapt_BR
dc.subject.otherAnticorpospt_BR
dc.subject.otherVacinaspt_BR
dc.subject.otherTranstornos Relacionados ao Uso de Substânciaspt_BR
dc.titleComparação de técnicas de ensaio de absorção imunoenzimático (ELISA) para avaliação da reatividade de anticorpos anticocaína tipo IgG em camundongos.pt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
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