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http://hdl.handle.net/1843/35053| Tipo: | Dissertação |
| Título: | Estudo de interação da proteína Pb27 de Paracoccidioides brasiliensis com um ligante nucleotídico e de sua aplicação em um biossensor |
| Autor(es): | Aline Mendes da Rocha |
| Primeiro Orientador: | Ronaldo Alves Pinto Nagem |
| Primeiro Coorientador: | Mariana Amalia Figueiredo Costa |
| Primeiro membro da banca : | Rafael Pinto Vieira |
| Segundo membro da banca: | Rafaela Salgado Ferreira |
| Resumo: | A proteína Pb27 de Paracoccidioides brasiliensis é um antígeno que tem sido estudado para a produção de vacinas e no diagnóstico da Paracoccidioidomicose (PCM), principal micose sistêmica da América Latina, cuja importância epidemiológica se deve à extensa área de endemicidade no Brasil, e ao acometimento de trabalhadores rurais em idade ativa. Recentemente, o primeiro modelo de estrutura da Pb27 foi determinado por cristalografia por difração de raios-X, e através de estudos de homologia estrutural a proteína foi classificada como uma nucleotidiltransferase de função desconhecida. Além disso, a triagem virtual de ligantes e estudos de ressonância nuclear magnética identificaram o nucleotídeo citidina trifosfato (CTP) como provável ligante da proteína. A fim de caracterizar quantitativamente a interação da Pb27 com esse nucleotídeo, foram realizados ensaios de interação por supressão de fluorescência de triptofano, fluorimetria diferencial de varredura e calorimetria de titulação isotérmica. Os resultados indicaram uma interação fraca, com constante de dissociação da ordem de 10^-3 M, exotérmica (ΔH = -34,3 KJ/mol) e exergônica (ΔG = -15,9 KJ/mol). Além disto, foram feitos estudos preliminares da utilização da proteína para a detecção de anticorpos anti-Pb27 em um biossensor impedimétrico, para futura utilização no diagnóstico da PCM. Os resultados indicaram o reconhecimento dos anticorpos pela proteína, por análise de espectroscopia de impedância eletroquímica. Porém, ainda são necessários mais estudos para a padronização dos biossensores, e futuros testes com o soro de pacientes. |
| Assunto: | Bioquímica Paracoccidioidomicose Nucleotidiltransferase Proteínas recombinantes Técnicas biossensoriais |
| Idioma: | por |
| País: | Brasil |
| Editor: | Universidade Federal de Minas Gerais |
| Sigla da Instituição: | UFMG |
| Departamento: | ICB - DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E IMUNOLOGIA |
| Curso: | Programa de Pós-Graduação em Bioquímica e Imunologia |
| Tipo de Acesso: | Acesso Restrito |
| URI: | http://hdl.handle.net/1843/35053 |
| Data do documento: | 27-Fev-2020 |
| Término do Embargo: | 27-Fev-2021 |
| Aparece nas coleções: | Dissertações de Mestrado |
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