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Tipo: Dissertação
Título: RT-PCR quantitativa para detecção de DENV em larvas de Aedes SP
Autor(es): Flávia Viana Ferreira
Primeiro Orientador: Erna Geessien Kroon
Resumo: Dengue virus 1 a 4 (família Flaviviridae, gênero Flavivirus) (DENV-1, 2, 3, 4), são responsáveis por estimados 50 milhões de casos anualmente. Infecções, ocasionadas por qualquer um dos quatro sorotipos, podem causar uma doença febril aguda e uma doença mais grave, muitas vezes fatal, caracterizada por hemorragias e síndrome do choque. O vírus é transmitido principalmente por mosquito Aedes aegypti e Aedes albopictus que, quando infectados pelo DENV, transmitem o vírus ao hospedeiro no momento do repasto sanguíneo. Os mosquitos podem adquirir o vírus ao picar um indivíduo infectado, do macho para a fêmea (transmissão venérea) e através da progênie. A transmissão vertical só ocorre quando o vírus multiplica-se no ovaríolo da fêmea e infecta os ovos. Por não existir uma terapêutica específica, o método mais eficaz de controle da doença é o combate direto ao vetor. Além disso, existem poucos estudos que abordam a competência vetorial, que é a capacidade do mosquito de infectar, manter a replicação e conseguir disseminar o vírus. Por isto que este trabalho teve como objetivo avaliar a carga viral de DENV de pools de larvas de Aedes sp coletados em Belo Horizonte- MG. A avaliação foi feita pela amplificação de DNA da região 5´UTR do DENV e como controle do gene da glutamino sintetase de Aedes sp, por qPCR. Para o desenvolvimento desta técnica foi testada uma mistura composta por reagentes que permitiu detectar e amplificar DENV em “pool” de larvas e até mesmo em uma única larva. Para a determinação do número de cópias de DENV por larvas, testes complementares deverão ainda ser feitos. Desta forma, os resultados obtidos no presente estudo indicam que foi possível detectar, através de uma técnica mais sensível, DENV em larvas de Aedes sp, e com perspectivas de uma quantificação dos números de cópias. Os estudos empregando esta metodologia serão importantes para avaliar a competência vetorial, indicando, através dos números de larvas infectadas, o risco de transmissão da dengue em uma determinada área e, dessa forma, auxiliar no controle e na prevenção da dengue no Brasil.
Abstract: Dengue virus 1 to 4 (family Flaviviridae, genus Flavivirus) (DENV-1, 2, 3, 4), are responsible for an estimated 50 million cases annually. Infections caused by any of the four serotypes can cause an acute febrile illness and a more serious, often fatal, characterized by hemorrhage and shock syndrome. The virus is mainly transmitted by Aedes aegypti and Aedes albopictus, when DENVinfected, transmit the virus to the host at the time of blood meal. Mosquitoes may acquire the virus by biting an infected person, male to female (venereal transmission) and through the progeny. Vertical transmission occurs only when the virus multiplies in the ovariole of the female and infected eggs. Because there is no specific therapy, the most effective method of disease control is direct combat the vector. In addition, there are few studies addressing vector competence, which is the ability to infect mosquitoes, and to keep replicating the virus spread. Why this study was to evaluate the viral load of DENV pools of Aedes sp collected in Belo Horizonte-MG. The evaluation was done by amplification of DNA from the 5'UTR region of DENV and the control of glutamine synthetase gene from Aedes sp by qPCR. To develop this technique was tested a mixture composed of reagents that detect and amplify DENV allowed in pool of larvae and even a single larva. To determine the number of copies of DENV by larvae, additional tests should still be made. Thus, the results of this study indicate that it was possible to detect, through a more sensitive technique, DENV on Aedes sp, and with prospects for a quantification of the numbers of copies. Studies using this methodology will be important to assess vector competence, stating, on the numbers of infected larvae, the risk of dengue transmission in a given area and thus assist in the control and prevention of dengue in Brazil.
Assunto: Microbiologia
Dengue
Aedes
Vírus da Dengue
Idioma: por
País: Brasil
Editor: Universidade Federal de Minas Gerais
Sigla da Instituição: UFMG
Departamento: ICB - INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLOGICAS
Curso: Programa de Pós-Graduação em Microbiologia
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
URI: http://hdl.handle.net/1843/43064
Data do documento: 18-Fev-2011
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