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http://hdl.handle.net/1843/52155| Type: | Tese |
| Title: | Produção e caracterização funcional de novas isoformas de fosfolipase D recombinantes da aranha Loxosceles similis |
| Authors: | Hortensia Gomes Leal |
| First Advisor: | Evanguedes Kalapothakis |
| First Referee: | Marília Martins Melo |
| Second Referee: | Maria Raquel Santos Carvalho |
| Third Referee: | Clara Guerra Duarte |
| metadata.dc.contributor.referee4: | Luciana Maria Silva |
| Abstract: | O loxoscelismo é um problema de saúde pública no Brasil, mas o veneno da aranha Loxosceles similis (Moenkhaus, 1898), que é uma espécie de importância médica e apresenta grande capacidade de se adaptar ao ambiente urbano, ainda é pouco caracterizado. Loxtox é uma família de enzimas fosfolipase D (PLD) que são o principal componente do veneno de Loxosceles e são responsáveis pelos efeitos clínicos do loxoscelismo. As toxinas Loxtox correspondem a 15% dos transcritos das glândulas de veneno de L. similis (Moenkhaus, 1898), no entanto, a família Loxtox de L. similis (Moenkhaus, 1898) ainda não foi totalmente caracterizada. Assim, este projeto teve como objetivo a caracterização funcional de Loxtox recombinantes e a análise da capacidade imunogênica das toxinas para a obtenção de anticorpos capazes de neutralizar os efeitos provocados pelo veneno de L. similis (Moenkhaus, 1898). Dessa forma, foram clonadas e caracterizadas duas toxinas Loxtox recombinantes, a recLoxtox s1A e a recLoxtox s11A. Ambas as toxinas recombinantes mostraram atividade in vitro dependendo do pH e a recLoxtox s1A causou efeitos mais intensos na pele de coelhos nos testes in vivo do que a rcLoxtox s11A. Ambas as toxinas recombinantes foram usadas em protocolos de imunização e epítopos mapeados nas toxinas recombinantes mostraram reações imunogênicas diferentes para os soros produzidos. Ainda, os anticopos policlonais gerados contra a recLoxtox s1A apresentou maior potencial para reduzir significativamente os efeitos in vitro e in vivo do veneno de L. similis (Moenkhaus, 1898). Assim, foram obtidas e caracterizadas duas novas isoformas de Loxtox do veneno de L.similis, as quais podem ser valiosas ferramentas biotecnológicas e imunológicas contra o loxoscelismo. |
| Abstract: | Loxoscelism is a recognized public health problem in Brazil, but the venom from Loxosceles similis (Moenkhaus, 1898) spider, which is widespread in Brazil due to its adaptability to the urban environment, remains poorly characterized. Loxtox is a family of phospholipase D enzymes (PLDs), which are the major components of Loxosceles venom and are responsible for the clinical effects of loxoscelism. Loxtox toxins correspond to 15% of L. similis (Moenkhaus, 1898) venom gland transcripts, but the Loxtox family of L. similis (Moenkhaus, 1898) has yet to be fully described. In this study, we aimed the functional charactereization of recombinant Loxtox and to analyze their immunological properties in order to obtain antibodies able to neutralize the effects evocked by L. similis (Moenkhaus, 1898) venom. Thus, we cloned and functionally characterized recLoxtox s1A and recLoxtox s11A. These recombinant toxins exhibited different in vitro activities depending on pH, and recLoxtox s1A had more intense effects on rabbit skin than did recLoxtox s11A in vivo. Both recombinant toxins were used in immunization protocols, and mapping of their epitopes revealed different immunological reactions for the produced immune serums. Additionally, polyclonal antibodies raised against recLoxtox s1A had greater capacity to significantly reduce the in vitro and in vivo effects of L. similis (Moenkhaus, 1898) venom. In summary, we obtained and characterized two novel Loxtox isoforms from L. similis (Moenkhaus, 1898) venom, which may be valuable biotechnological and immunological tools against loxoscelism. |
| Subject: | Genética Aranhas Venenos de aranha Fosfolpases Soro Antivenenos |
| language: | por |
| metadata.dc.publisher.country: | Brasil |
| Publisher: | Universidade Federal de Minas Gerais |
| Publisher Initials: | UFMG |
| metadata.dc.publisher.program: | Programa de Pós-Graduação em Genética |
| Rights: | Acesso Aberto |
| URI: | http://hdl.handle.net/1843/52155 |
| Issue Date: | 10-Sep-2021 |
| Appears in Collections: | Teses de Doutorado |
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