Resposta imune celular na doença de Chagas crônica: Integração das respostas no sangue e coração, mimetismo molecular e fatores genéticos associados à cardiopatia

Abstract

Desordens no perfil de moléculas imunes têm sido observadas no sangue periférico de pacientes com diferentes formas clínicas da doença de Chagas, uma doença negligenciada causada pela infecção com o Trypanosoma cruzi, e no coração dos pacientes portadores da cardiopatia chagásica crônica (CCC). A CCC está intimamente relacionada com resposta inflamatória, enquanto que a forma indeterminada associa-se ao estabelecimento de uma resposta imune mais controlada. As células T desempenham papel crucial na imunopatogênese da doença, reconhecendo antígenos do parasito e, eventualmente, do hospedeiro, através da interação entre o receptor de células T (T cell receptor, TCR) e complexo principal de histocompatibilidade (Major Histocompatibility Complex, MHC ou Human Leukocyte Antigen, HLA). Os alelos do HLA-DRB1 contendo o motivo de aminoácidos DERAA são frequentes em pacientes com CCC, os quais também apresentam elevada frequência de células T CD4+ expressando TCR específico. Nossos estudos foram guiados por quatro hipóteses de trabalho: (1) características imuno-inflamatórias observadas no coração dos pacientes com CCC são refletidos, pelo menos parcialmente, de forma sistêmica; (2) o perfil transcricional de células relacionadas à resposta inata e adaptativa apresenta diferenças entre pacientes com as formas indeterminadas e cardíaca da doença; (3) mimetismo molecular e alelos de HLA-DRB1 contendo o motivo DERAA são associados à ativação de células T CD4+ na CCC; (4) O perfil transcricional de células T CD4+ Vbeta5.1 estão associado à patogênese da CCC. Assim, avaliamos a relação dos marcadores imunes no sangue e tecido cardíaco de pacientes com CCC. De forma interessante, 75% dos fatores solúveis avaliados no plasma exibiram consistência com seus níveis de expressão gênica no coração de pacientes com CCC, indicando que o sangue é um valioso compartimento não invasivo para compreender a imunopatogênese de Chagas. Os dados de perfil transcricional de células do sangue revelam padrões distintos de expressão gênica em diferentes grupos de células mieloides e linfoides entre pacientes indeterminados e com a CCC. A coorte CCC foi caracterizada pela regulação positiva de genes relacionados a processos inflamatórios, citotóxicos e pró-apoptóticos, os quais podem ser usados como marcadores de progressão da doença. Ao analisar a relação dos alelos do HLA-DRB1 com a apresentação de antígenos às células T CD4+, observamos que os alelos de HLA restritos ao DERAA demonstram afinidade de ligação com peptídeos do T. cruzi que apresentam similaridade de sequência às proteínas do hospedeiro. Além disso, esses peptídeos (do parasito e próprios) demonstraram habilidade de induzir ativação e proliferação de células T CD4+ apenas dos pacientes com CCC. Também, estudos de sequenciamento de RNA em células únicas mostrou que as células T CD4+ TCR específico (Vβ5) dos pacientes CCC exibem expressão aumentada de genes relacionados à citotoxicidade, inflamação exaustão e senescência celular, os quais foram validados pela citometria de fluxo. Esses achados destacam marcadores imunológicos associados à CCC e potenciais alvos para predição da progressão da doença e desenvolvimento de ferramentas de abordagem terapêutica.