Leucose enzoótica bovina: isolamento de amostras brasileiras do vírus e obtenção de antígeno

Grazielle Cossenzo Florentino

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-A9CFVN

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DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor1	Romulo Cerqueira Leite	pt_BR
dc.creator	Grazielle Cossenzo Florentino	pt_BR
dc.date.accessioned	2019-08-09T17:36:28Z	-
dc.date.available	2019-08-09T17:36:28Z	-
dc.date.issued	2014-02-25	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/1843/BUBD-A9CFVN	-
dc.description.abstract	Bovine leukemia virus presents a worldwide distribution and commonly affects dairy cattle causing economical losses related to increased heifer replacement costs, loss of income from condemned carcasses of cull cows, reduced fertility and decreased milk production. Diagnostic techniques recommended by the World Organization for Animal Health (OIE) are agar gel immunodiffusion test (AGID) and the enzyme linked immunosorbant assay (ELISA). In Brazil there is a commercially available IDGA test (IDGA-Cm) is based on antigen produced by a fetal lamb kidney (FLK) cell line persistent infected with BLV and bovine viral diarrhea virus. ELISA tests to BLV are not commercially available in Brazil, and the cost associated to import process prevents its use in large scale in the country. The aims of this study were to: 1. isolate BLV from peripheral blood mononuclear cells from naturally infected cows using the cell line Tb1lu, which is BVDV-free; 2. produce an antigen from Brazilian BLV isolates; 3. compare the IDGA developed in this study with the IDGA-Cm and the commercially available ELISA. Seven PBMC samples positive for BLV by reverse-transcriptase PCR were used for viral isolation attempt using Tb1lu cell. Four of seven samples were isolated as conformed by PCR and electron microscopy. One isolate was select for antigen production and development. One hundred and eighty samples from two field BLV positive. The antigens A and B were less sensitive compared to ELISA. BLV were successfully isolated from field samples using the Tb1lu cells, and used for the development of a in-house IDGA.	pt_BR
dc.description.resumo	O vírus da leucose bovina (BLV) apresenta distribuição mundial e acomete principalmente bovinos leiteiros, gerando perdas econômicasdevido ao descarte precoce de animais, condenação de carcaça ao abate, redução das taxas fertilidade e queda na produção de leite. Uma das técnicas de diagnóstico preconizadas pela OIE para o diagnóstico da LEB são imunodifusão em gel Ágar (IDGA) e ensaio imunoenzimático (ELISA). No Brasil, o único teste comercial disponível é baseado no IDGA (Antígeno A) produzido a partir de uma linhagem celular de rim fetal de ovinos (FLK). Essa é persistentemente inctada pelo BLV e pelo vírus da diarréia viral bovina. Devido à necessidade de importação do teste de ELISA, os custos inviabilizam o uso desta técnica em grande escala no país. Os objetivos deste trabalho foram: 1. realizar o isolamento do BLV a partir de células mononucleares do sangue periférico de bovinos naturalmente infectados pelo BLV utilizando a linhagem celular Tb1lu, livre de BVDV; 2. produzir um antígeno B a partir dos isolados brasileiros de BLV; 3. comparar os resultados sorológico obtidos utilizando as técnicas de IDGA e ELISA frente ao antígeno preparado a partir de uma amostra de BLV brasileira. Para isso, amostras de PBMC de sete animais positivos para BLV foram utilizadas no isolamento viral em células Tb1lu. Quatro amostras foram positivas no isolamento, posteriormente foi confirmado por PCR. Um isolado foi escolhido para produção do antígeno B. Cento e oitenta amostras de campo de duas propriedades positivas para o BVL foram utilizadas para avaliar os testes. Os antígenos A e B foram menos sensíveis quando comparados com a técnica de ELISA. Foi possível realizar o isolamento de amostras de campo de BLV em células Tb1lu e produzir um antígeno B para o teste de IDGA.	pt_BR
dc.language	Português	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal de Minas Gerais	pt_BR
dc.publisher.initials	UFMG	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	produção de antígeno	pt_BR
dc.subject	IDGA	pt_BR
dc.subject	vírus da leucose bovina (BLV)	pt_BR
dc.subject	isolamento viral	pt_BR
dc.subject	ELISA	pt_BR
dc.subject.other	Vírus da leucose bovina	pt_BR
dc.subject.other	Bovino Doenças	pt_BR
dc.subject.other	Leucose bovina	pt_BR
dc.subject.other	Antígenos	pt_BR
dc.title	Leucose enzoótica bovina: isolamento de amostras brasileiras do vírus e obtenção de antígeno	pt_BR
dc.type	Dissertação de Mestrado	pt_BR
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