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http://hdl.handle.net/1843/BUDB-8BRF8M| Tipo: | Dissertação de Mestrado |
| Título: | ELISA sanduíche para detecção de toxina beta produzida pelo Clostridium perfringens tipos B e C |
| Autor(es): | Augusto Vinicius Arruda de Carvalho |
| Primeiro Orientador: | Francisco Carlos Faria Lobato |
| Primeiro Coorientador: | Luiz Guilherme Dias Heneine |
| Primeiro membro da banca : | Zelia Ines Portela Lobato |
| Segundo membro da banca: | Andrey Pereira Lage |
| Terceiro membro da banca: | Vera Lucia Viegas de Abreu |
| Quarto membro da banca: | Thais Viana de Freitas |
| Resumo: | Padronizou-se o teste ELISA sanduíche para a detecção da beta toxina produzida pelo Clostridium perfringens tipos B e C. A toxina beta foi purificada pelos métodos da afinidade metálica e imunoafinidade e destoxificada pelo método da iodação controlada para a produção de imunoglobulinas e conjugado de IgG de carneiro antibeta toxina. O ELISA sanduíche mostrou-se sensível detectando 2,44ng/mL de toxina beta purificada em PBS e em conteúdo intestinal. Quando comparado com o teste de toxicidade em camundongos o ELISA mostrou ser 1000 vezes mais sensível, detectando 0,01 DMM/mL de toxina beta não purificada em conteúdo intestinal artificialmente contaminado. |
| Abstract: | An ELISA test was developed and standardized to detect beta toxin produced by the Clostridium perfringens types B and C. The beta toxin was purified by metal affinity chromatography and immunoaffinity chromatography and detoxified by the method of controlled iodination. Anti-toxin IgG raised in sheep were purified on a beta toxin affinity column and conjugated to horse radish peroxidase. The sandwich ELISA detected 2.44ng/ml of the purified beta toxin in PBS buffer and intestinal content. The ELISA compared favourably to the toxicity test in mice, showing an 1000 fold higher sensitivity, detecting 0,01 DMM/mL, of nonpurified beta toxin in intestine content artificially contaminated. |
| Assunto: | Clostridium Toxinas Enterotoxemia Teste imunoenzimático Clostridium perfringens |
| Idioma: | Português |
| Editor: | Universidade Federal de Minas Gerais |
| Sigla da Instituição: | UFMG |
| Tipo de Acesso: | Acesso Aberto |
| URI: | http://hdl.handle.net/1843/BUDB-8BRF8M |
| Data do documento: | 14-Jun-2004 |
| Aparece nas coleções: | Dissertações de Mestrado |
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