Caracterização da primeira microcina e de outras bacteriocinas sintetizadas por Shigella sonnei

Jaqueline Silvana Moreira

Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9PXGER

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DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor1	Paula Prazeres Magalhaes	pt_BR
dc.contributor.advisor-co1	Luiz de Macêdo Farias	pt_BR
dc.contributor.advisor-co2	Mireille Angela Bernardes Sousa	pt_BR
dc.creator	Jaqueline Silvana Moreira	pt_BR
dc.date.accessioned	2019-08-09T16:17:27Z	-
dc.date.available	2019-08-09T16:17:27Z	-
dc.date.issued	2014-02-28	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9PXGER	-
dc.description.abstract	Shigella is the etiologic agent of shigellosis a severe type of inflammatory diarrhea. The disease is prevalent mainly among children aged up to five years that live in underdeveloped countries as a result from poor hygiene and sanitation. Bacteriocins are antibacterial proteinaceous substances synthesized by a wide range of bacteria including Shigella. A Shigella sonnei isolate (SS9) obtained from fecal specimen of a child with acute diarrhea previously tested for bacteriocin expression was selected for this study. Proteic intracellular fractions precipitated at 30 % (C-30) and 75 % (C-75) of ammonium sulfate were obtained. C-75 was submitted to sequential steps of chromatography that resulted in one purified fraction and some partially purified fractions. The molecular mass of the active fraction as determined by mass spectrometry was 7.2 kDa. The partial amino acid sequence of the substance was analyzed by using BLAST and BACTIBASE databases. The results showed that it corresponds to a new bacteriocin. The antagonistic substance corresponds to a microcin a class of bacteriocins not described for Shigella yet. SS9 expressed antagonistic activity mainly against taxonomically related strains. SDS-PAGE and in situ antagonistic activity test demonstrated that SS9 is able to synthesize more than one antagonistic substance. The evaluation of CIM and CBM as well as of the mode of action of the antagonistic substance(s) showed that SS9 exhibited bactericidal activity. Taken together our data suggest the expression of more than one colicin and microcin. It is reasonable to hypothesize that this ability may contribute to the virulence of S. sonnei helping in the competition against other enteropathogens or members of the intestinal microbiota.	pt_BR
dc.description.resumo	Shigella, gênero incluído na família Enterobacteriaceae, é responsável pela disenteria bacilar ou shigelose, forma grave de doença diarreica de natureza inflamatória. O quadro acomete, principalmente, crianças com idade inferior a cinco anos que vivem em países menos desenvolvidos, em decorrência de condições de higiene e saneamento básico inadequadas. Bacteriocinas são substâncias com atividade antibacteriana, produzidas por uma gama ampla de microrganismos, inclusive Shigella. Uma amostra de Shigella sonnei (SS9) isolada de espécime fecal de criança com diarreia aguda, sabidamente produtora de substância antagonista, foi selecionada para o estudo. Frações proteicas intracelulares foram precipitadas a concentrações de 30 % (C-30) e 75 % (C-75) de sulfato de amônio. C-75 foi submetido a etapas sequenciais de cromatografia, que permitiram a obtenção de uma fração ativa purificada e outras frações parcialmente purificadas. A massa molecular da fração ativa purificada, determinada por espectrometria de massas, foi de 7,2 kDa e a comparação da sequência parcial de aminoácidos com proteínas depositadas nos bancos de dados BLAST e BACTIBASE revelou a detecção uma nova bacteriocina. A substância enquadra-se na definição de microcina, classe de bacteriocina ainda não descrita para Shigella. SS9 expressou atividade especialmente contra amostras filogeneticamente relacionadas. As análises por SDS-PAGE e teste de atividade in situ evidenciaram a produção de mais de uma substância antagonista. Os ensaios para determinação da CIM e CBM confirmaram os resultados dos testes para avaliação do modo de ação da(s) substância(s) antagonista(s), demonstrando ação bactericida de SS9. Em conjuntos, os dados sugerem a síntese de mais de uma colicina e microcina, habilidade que pode conferir à amostra de S. sonnei vantagem seletiva tanto contra outras bactérias diarreiogênicas como contra membros da microbiota intestinal indígena, representando, assim, um fator de virulência para o organismo.	pt_BR
dc.language	Português	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal de Minas Gerais	pt_BR
dc.publisher.initials	UFMG	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	Diarreia aguda	pt_BR
dc.subject	Shigella sonnei	pt_BR
dc.subject	Bacteriocinas	pt_BR
dc.subject	Microcinas	pt_BR
dc.subject.other	Microbiologia	pt_BR
dc.subject.other	Shigella sonnei	pt_BR
dc.subject.other	Microcina	pt_BR
dc.subject.other	Bacteriocinas	pt_BR
dc.subject.other	Desinteria	pt_BR
dc.title	Caracterização da primeira microcina e de outras bacteriocinas sintetizadas por Shigella sonnei	pt_BR
dc.type	Dissertação de Mestrado	pt_BR
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