Identificação de transcritos gênicos sexo-específicos de Ancylostoma braziliense (de Faria, 1910).

Ana Flavia Dias Vieira da Costa

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DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor1	Elida Mara Leite Rabelo	pt_BR
dc.contributor.referee1	Maria Aparecida Gomes	pt_BR
dc.contributor.referee2	Daniella Castanheira Bartholomeu	pt_BR
dc.creator	Ana Flavia Dias Vieira da Costa	pt_BR
dc.date.accessioned	2019-08-12T03:26:19Z	-
dc.date.available	2019-08-12T03:26:19Z	-
dc.date.issued	2007-02-15	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/1843/SAGF-765FY6	-
dc.description.resumo	ResumoO Ancylostoma braziliense é um parasito nematódeo que representa risco para a saúde humana e animal. Em virtude das diferenças fisiológicas inerentes entre machos e fêmeas, é de se esperar que ocorram variações no perfil de transcritos gênicos entre os dois sexos. Neste trabalho, a técnica de apresentação diferencial de RNAs (DDRT-PCR) foi utilizada com o intuito de identificar transcritos gênicos diferencialmente expressos entre os sexos de A. braziliense. Para alcançar esse objetivo, RNAs dos dois sexos foram extraídos, o cDNA foi preparado e submetido a reações de PCR utilizando iniciadores aleatórios em condições de baixa estringência. Inicialmente, 18 fragmentos foram identificados como específicos ou mais expressos por um dos sexos, sendo que 13 foram clonados e seqüenciados. Estas seqüências foram submetidas à pesquisa de homologia em bancos de dados, totalizando 19 ESTs a serem testadas. O caráter de expressão diferencial foi avaliado pelas técnicas de RT-PCR semiquantitativa, para os fragmentos que se mostraram diferencialmente expressos no teste inicial de iniciadores, e por PCR em tempo real para todos os fragmentos selecionados. Houve a confirmação da expressão diferencial de nove ESTs, dentre as 19 testadas, sendo sete mais expressas por machos e duas por fêmeas. Dentre elas, duas não apresentaram homologias significativas com seqüências depositadas em banco de dados, representando possivelmente novos transcritos gênicos. As outras se mostraram semelhantes a seqüências de cDNAs de Ancylostoma ceylanicum (Ab1.3m), Nippostrongylus brasiliensis e gônada de fêmeas de Ascaris suum (Ab14.1f), proteína hipotética de Caenorhabditis elegans (Ab2.1m), mRNAs precursores da ASP-5 de Ancylostoma caninum (Ab15.1), de paracaspase de C. elegans (Ab.17.4) e do inibidor de protease tipo Kunitz de A. caninum (Ab1.2m e Ab16.1m). Além disso, foi avaliado, em A. caninum e A. ceylanicum, o perfil de expressão de genes do inibidor tipo Kunitz, duplamente confirmado como mais expresso em machos de A. braziliense. Para isso, foi feita a extração de RNA de ambos os sexos das duas espécies, síntese de cDNA e reações de PCR em tempo real, que verificou expressão amplamente superior desses genes em machos das duas espécies, demonstrando que isso deve ser verdadeiro para os outros membros da família Ancylostomatidae.	pt_BR
dc.language	Português	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal de Minas Gerais	pt_BR
dc.publisher.initials	UFMG	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	genes sexo-especificos	pt_BR
dc.subject	apresentação diferencial de RNA	pt_BR
dc.subject	PCR semi-quantitativa	pt_BR
dc.subject	Ancilostomideos	pt_BR
dc.subject	PCR em tempo real	pt_BR
dc.subject	Ancylostoma braziliense	pt_BR
dc.subject.other	Parassitologia	pt_BR
dc.subject.other	Ancylostoma braziliense	pt_BR
dc.subject.other	Ancilostomídeos	pt_BR
dc.title	Identificação de transcritos gênicos sexo-específicos de Ancylostoma braziliense (de Faria, 1910).	pt_BR
dc.type	Dissertação de Mestrado	pt_BR
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