Identificação de genes diferencialmente expressos em cepas de Entamoeba histolytica após ativação da virulência.

Helen Cristine Fernandes

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DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor1	Maria Aparecida Gomes	pt_BR
dc.contributor.advisor-co1	Elida Mara Leite Rabelo	pt_BR
dc.contributor.referee1	Helida Monteiro de Andrade	pt_BR
dc.contributor.referee2	Ricardo Nascimento Araujo	pt_BR
dc.creator	Helen Cristine Fernandes	pt_BR
dc.date.accessioned	2019-08-12T07:42:55Z	-
dc.date.available	2019-08-12T07:42:55Z	-
dc.date.issued	2009-02-17	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8H9MYV	-
dc.description.resumo	Entamoeba histolytica é um protozoário parasito que representa risco para a saúde de milhões de indivíduos. Em virtude da existência de diversas formas clínicas da doença e de cepas com virulências distintas, é de se esperar que ocorram variações no perfil de transcritos gênicos entre cepas atenuadas e virulentas. Neste trabalho, a técnica de apresentação diferencial de RNAs (DDRT-PCR) foi utilizada com o intuito de identificar genes diferencialmente expressos entre cepas atenuadas, HM1 e CSP e reisoladas (virulenta), HM1R e CSPR de E. histolytica. Para alcançar esse objetivo, RNAs das cepas atenuadas e reisoladas foram extraídos, o cDNA foi preparado e submetido a reações de PCR utilizando iniciadores aleatórios em condições de baixa estringência. Inicialmente, 29 fragmentos foram identificados como específicos das cepas reisoladas, sendo que 14 foram clonados e seqüenciados. Estas seqüências foram submetidas à pesquisa de homologia em bancos de dados, totalizando 12 genes a serem testados. O caráter de expressão diferencial foi avaliado pelas técnicas de RT-PCR semiquantitativa e por PCR em tempo real para 11 dos genes encontrados. Houve a confirmação da expressão diferencial de todos, sendo 10 mais expressos pelas cepas reisoladas e um pelas cepas atenuadas. Os genes confirmados, por RT-PCR em tempo real e RT-PCR semiquantitativa, como mais expressos nas cepas reisoladas de E. histolytica foram os que codificam proteínas hipotéticas, fosfatase ácida, fator de troca de nucleotídeo Ras guanina, enzima envolvida no transporte de cálcio e proteína similar à cdc48. Além disso, também foi avaliada, entre as cepas atenuadas e reisoladas a expressão dos genes da acetiltransferase, triptofanil tRNA sintetase, proteína diaphaunos e cisteil proteinase 1, considerados mais expressos em trofozoítos provenientes de lesão em fígado de hamster quando comparados aos de cultura. Destes, os três primeiros foram mais expressos nas cepas reisoladas, demonstrando que o perfil de transcrição, ao menos para alguns genes, nas cepas reisoladas reflete ao encontrado nos trofozoítos presentes em abscesso hepático em modelo experimental.	pt_BR
dc.language	Português	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal de Minas Gerais	pt_BR
dc.publisher.initials	UFMG	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	apresentação diferencial de RNA	pt_BR
dc.subject	PCR semi-quantitativa	pt_BR
dc.subject	expressão gênica	pt_BR
dc.subject	PCR em tempo real	pt_BR
dc.subject	Entamoeba histolytica	pt_BR
dc.subject	virulência	pt_BR
dc.subject.other	Parasitologia	pt_BR
dc.subject.other	Virulência (Microbiologia)	pt_BR
dc.subject.other	PCR em tempo real	pt_BR
dc.subject.other	Entamoeba histolytica	pt_BR
dc.subject.other	PCR quantitativa	pt_BR
dc.subject.other	Expressão gênica	pt_BR
dc.subject.other	Edição de RNA	pt_BR
dc.subject.other	Genética Expressão	pt_BR
dc.title	Identificação de genes diferencialmente expressos em cepas de Entamoeba histolytica após ativação da virulência.	pt_BR
dc.type	Dissertação de Mestrado	pt_BR
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