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Type: Dissertação de Mestrado
Title: N-Acetil-B-D-glucosaminidase (NAG): padronização de ensaio espectrogométrico automático em urina de cães
Authors: Luiz Eduardo de Souza Tassini
First Advisor: Fabiola de Oliveira Paes Leme
First Referee: Marcela de Lacerda Alexandrino
Second Referee: Julio Cesar Cambraia Veado
Abstract: A determinação de injúria renal, especialmente pela avaliação da atividade de enzimas urinárias, é uma importante ferramenta para o médico veterinário, especialmente, por sua precocidade em relação aos métodos de avaliação da função renal, que são considerados tardios, visto que a instalação da injúria precede a alteração da função. Neste estudo foi realizada a padronização de reagentes, determinação de valor de referência (com e sem correção para densidade urinária) e avaliação de estabilidade em diferentes faixas de temperatura da enzima NAG (N-Acetyl--D-Glucosaminidase) para cães (machos e fêmeas), hígidos de diferentes faixas etárias. Para a padronização de reagentes para avaliação de atividade urinária de NAG em cães, a enzima apresentou pH ótimo e concentração de substrato similares aos utilizados em kits comerciais para avaliação da atividade desta enzima em humanos. A automatização da técnica de avaliação da atividade urinária de NAG em humanos, para cães hígidos de diferentes faixas etárias, mostrou-se eficaz. Por meio de análise estatística, observou-se que a NAG apresenta correlação positiva com a idade do animal e com a densidade urinária. Quando aplicada a fórmula de correção para densidade urinária de 1,025, o intervalo de confiança médio de atividade urinária da NAG foi menor do que quando não se realizou a correção e estatisticamente concluiu-se que a atividade urinária de NAG, com correção de densidade urinária é mais precisa. Para avaliação da estabilidade urinária da enzima, foram analisados três métodos de conservação de urina em temperaturas de -20º C, 2-8º C e 20-30º C, com tempos de armazenamento de 24, 48, 72 horas, 7 e 15 dias. Concluiu-se que o método de armazenamento das amostras de urina em temperatura de 2-8º C é um método confiável de armazenamento por até 7 dias, sem que haja alterações estatísticas nos valores encontrados nas análises das amostras. Os métodos de conservação em temperaturas de -20º C e em temperaturas de 20-30º C demonstraram-se inadequados para conservação de amostras de urina para posterior avaliação da atividade de NAG urinária devido às diferenças estatísticas nas médias ao longo do tempo.
Abstract: The determination of renal injury, especially through the assessment of the activity of urinary enzymes, is an important tool for the veterinary doctor, especially by its precocity in relation to methods of evaluation of renal function, which are considered to happen late, since the installation of injury precedes the change in the function. In this study was performed the standardization of reagents, determination of a reference value (with and without correction for urine density) and assessment of stability - in different temperature ranges - the enzyme NAG (N-acetyl-beta-D-glucosaminidase) for dogs (male and female), healthy individuals of different age groups. For the standardization of reagents for evaluation of urinary activity of NAG in dogs, the enzyme showed optimal pH and concentration of substrate similar to those used in commercial kits for evaluation of the activity of this enzyme in humans. The automation of the technique for the assessment of urinary NAG activity in humans, for healthy dogs in different age groups, has proved to be effective. By means of statistical analysis, it was observed that NAG presents a positive correlation with the age and urine density of the animal. Once applied the correction formula for urinary specific density of 1.025, the average confidence interval of urinary activity of NAG was shorter than when there was no correction and statistically it was concluded that the activity of urinary NAG, with correction of urinary density is more accurate. In order To evaluate the stability of urinary enzyme, were analyzed three methods of conservation of urine in temperatures of -20 C, 2-8C and 20-30C, with retention times of 24, 48, 72 hours and 7 and 15 days. It was concluded that the storage method of urine samples at a temperature of 2-8C is a reliable method of storage for up to 7 days, without any statistical changes in the values found in the analyzes of the samples. The methods of conservation in temperatures of -20 C and at temperatures of 20-30C proved to be unsuitable for conservation of urine samples for later evaluation of urinary activity of NAG due to statistical differences in average values over time.
Subject: Ciência animal
language: Português
Publisher: Universidade Federal de Minas Gerais
Publisher Initials: UFMG
Rights: Acesso Aberto
URI: http://hdl.handle.net/1843/SMOC-A54FV7
Issue Date: 29-Apr-2015
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