Detecção e quantificação de Campylobacter spp. em carcaças de frango resfriadas e congeladas por PCR em tempo real associada a propídeo monoazida (PMA)

Andrea Guicheney Salgado e Almeida Castro

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DC Field	Value	Language
dc.contributor.advisor1	Silvana de Vasconcelos Cancado	pt_BR
dc.contributor.advisor-co1	Marcelo Resende de Souza	pt_BR
dc.contributor.referee1	Marcelo Resende de Souza	pt_BR
dc.contributor.referee2	Telma Maria Alves	pt_BR
dc.creator	Andrea Guicheney Salgado e Almeida Castro	pt_BR
dc.date.accessioned	2019-08-14T03:38:29Z	-
dc.date.available	2019-08-14T03:38:29Z	-
dc.date.issued	2015-08-28	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/1843/SMOC-A7ER7D	-
dc.description.abstract	The contamination of broiler carcasses by Campylobacter spp. is common and its assessment is difficult because of its tedious feature. Methods such as Real-Time Polymerase Chain Reaction (PCR) were developed to verify the presence of the microorganism, but it is also necessary to determine their viability as only live bacteria are capable of causing foodborne disease. The Propidium monoazide (PMA) is a DNA intercalator that can penetrate only in non-viable cells, preventing their DNA to be amplified by real time PCR. In order to detect and verify the viability of Campylobacter spp., frozen and refrigerated broiler carcasses were analysed. Sixty samples of broiler carcasses were collected in a poultry slaughterhouse under federal inspection (30 refrigerated and 30 frozen) and analysed by Real-Time PCR and Real-Time PCR after PMA treatment. It was observed that when samples were treated with PMA, both frozen and refrigerated carcasses, had the lowest positivity rate compared to untreated samples with DNA intercalator (p <0.001). Fifty three out of 60 samples analysed by Real-Time PCR (88.33%) were positive for Campylobacter spp., while 11 (18.33%) tested positive by Real-Time PCR with treatment by PMA. For the Real-Time PCR, 26 (86.67%) refrigerated samples and 27 (90%) frozen samples were positive for Campylobacter spp. When PMA was used, nine (30%) refrigerated samples and two (6.67%) frozen samples tested positive for the bacteria. It was also observed that a smaller number of frozen carcasses contained viable microorganism compared to the refrigerated carcasses (p <0.05). It is concluded that the use of low temperatures in storage of carcases was effective in controlling contamination of carcasses by Campylobacter spp. using Real-Time PCR with PMA comparing with Real-Time PCR without PMA treatment. Furthermore, the microorganism keeps viable more frequently in refrigerated carcass, comparing with frozen carcass	pt_BR
dc.description.resumo	A contaminação de carcaças de frangos de corte por micro-organismos do gênero Campylobacter é frequente. No entanto, sua detecção é dificultada devido a sua característica fastidiosa. Metodologias como a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) em Tempo Real foram desenvolvidas para verificar a presença do micro-organismo. Porém, também é necessário determinar sua viabilidade visto que apenas bactérias vivas são capazes de causar infecções alimentares no homem. O propídio monoazida (PMA) é um intercalante de DNA capaz de penetrar apenas em células não viáveis, impedindo que seu DNA seja amplificado pela técnica da PCR em tempo real. Com o objetivo de detectar e quantificar Campylobacter spp. viável em carcaças de frango de corte congeladas e resfriadas, foram analisadas 60 amostras de carcaças de frangos (30 resfriadas e 30 congeladas) pela metodologia da PCR em tempo real com e sem o tratamento pelo PMA. Foi observado que quando as amostras foram tratadas com PMA, tanto as carcaças congeladas quanto as resfriadas, tiveram menor taxa de positividade em relação às amostras não tratadas com este intercalante de DNA (p<0,001). Das 60 amostras analisadas pela metodologia da PCR em tempo real, 53 (88,33%) apresentaram resultado positivo para Campylobacter spp., enquanto 11 (18,33%) tiveram resultado positivo utilizando-se o método PCR em tempo real com tratamento pelo PMA. Pela técnica da PCR em tempo real sem o tratamento com PMA, 26 (86,67%) amostras resfriadas e 27 (90%) amostras congeladas apresentaram resultados positivos para Campylobacter spp.. Quanto utilizado o PMA, foi observado que um menor número de carcaças congeladas continha o micro-organismo viável, duas (6,67%), quando comparado às nove (30%) carcaças resfriadas positivas (P<0,05). Conclui-se que o armazenamento de carcaças de frango de corte em temperaturas de refrigeração e congelamento é eficaz na redução da positividade para Campylobacter spp. quando utilizada a técnica de PCR em tempo real com tratamento por PMA em relação à PCR em tempo real sem o tratamento com o intercalante de DNA. Além disso, o micro-organismo se mantem viável com maior frequência em carcaças resfriadas, quando comparado a carcaças congeladas	pt_BR
dc.language	Português	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal de Minas Gerais	pt_BR
dc.publisher.initials	UFMG	pt_BR
dc.rights	Acesso Aberto	pt_BR
dc.subject	PMA	pt_BR
dc.subject	PCR em tempo real	pt_BR
dc.subject	carcaças de frangos de corte	pt_BR
dc.subject	temperatura de armazenamento	pt_BR
dc.subject.other	Frango de corte Carcaças	pt_BR
dc.subject.other	Campylobacter	pt_BR
dc.subject.other	Reação em cadeia de polimerase	pt_BR
dc.title	Detecção e quantificação de Campylobacter spp. em carcaças de frango resfriadas e congeladas por PCR em tempo real associada a propídeo monoazida (PMA)	pt_BR
dc.type	Dissertação de Mestrado	pt_BR
Appears in Collections:	Dissertações de Mestrado

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