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http://hdl.handle.net/1843/SSLA-7UDHRY| Tipo: | Dissertação de Mestrado |
| Título: | Avaliação das características do espermatozóide eqüino congelado submetido a inclusão e remoção do colesterol das membranas |
| Autor(es): | Camila Haddad de Oliveira |
| Primeiro Orientador: | Monique de Albuquerque Lagares |
| Resumo: | A inclusao de colesterol no diluidor tem sido reportada como uma alternativa para aumentar a estabilidade das membranas do espermatozoide de diversas especies durante a criopreservacao. No entanto, a fertilidade in vivo e reduzida em comparacao ao semen congelado sem a inclusao do colesterol. Os objetivos do presente trabalho foram avaliar a motilidade progressiva, a integridade funcional e fisica da membrana plasmatica (teste hiposmotico e coloracao de Iodeto de Propideo, respectivamente), a integridade do acrossoma (coloracao com FITC-PNA) e a capacidade do espermatozoide em sofrer a reacao acrossomica (induzida com ionoforo de calcio A23187), apos inclusao e remocao do colesterol de suas membranas. Para tal, foi congelado um ejaculado de 12 garanhoes. O semen foi submetido a quatro tratamentos: (1) congelamento convencional; (2) semen acrescido de colesterol; (3) tratamento 2 com a remocao do colesterol pos-descongelamento com 0,052 mg de metil-À-ciclodextrina/50 x 106 espermatozoides; (4) tratamento 2 com a remocao de colesterol pos-descongelamento com 0,156 mg de metil-À-ciclodextrina/50 x 106 espermatozoides. Nao foi observada diferenca quanto a motilidade progressiva e funcionalidade da membrana plasmatica dos espermatozoides entre os tratamentos. No entanto, foi observada reducao da integridade da membrana plasmatica nos tratamentos 1, 3 e 4, quando comparados ao tratamento 2, sugerindo um efeito toxico da ciclodextrina nos dois ultimos tratamentos. A inclusao do colesterol aumentou a porcentagem de espermatozoides com acrossoma integro apos a inducao da reacao acrossomica. Entretanto, nao foi observada reducao da porcentagem de espermatozoides com acrossoma integro quando foi realizada a inducao de sua remocao com as duas concentracoes de ciclodextrina. Visto que a taxa de reacao acrossomica induzida in vitro pode ser indicativo da fertilidade in vivo, mais estudos devem ser realizados para aumentar a taxa de reacao acrossomica in vitro sem que haja reducao de integridade de membrana plasmatica |
| Abstract: | Cholesterol incorporation to the sperm membranes has been reported as an alternative to improve the membrane stability of several species spermatozoa during the cryopreservation. However, in vivo fertility is reduced compared to cryopreservation of control sperm (without cholesterol). The aim of the present study was to evaluate the progressive motility, the functional and physical integrity of the plasma membrane (hyposmotic swelling test and evaluation with Propidium iodide, respectively), the acrossomal integrity (evaluation with FITC-PNA) and the ability of sperm to acrosome react (induction of the acrosome reaction with calcium ionophore - A23187), after incorporating and removing the cholesterol from sperm membranes. One ejaculate of twelve stallions was collected. Semen was submitted to four treatments: (1) conventional cryopreservation; (2) semen treated with cholesterol; (3) treatment 2 following removal of the cholesterol post-thawing with 0,052 mg of methyl-â-cyclodextrin/50 x 106 sperm; (4) treatment 2 following removal of the cholesterol post-thawing with 0,156 mg of methyl- â-cyclodextrin/50 x 106 sperm. No differences were observed in relation to progressive motility and plasma membrane functionality of sperm between treatments. However, it was observed fewer sperm with intact plasma membrane in treatments 1, 3, and 4, when compared to treatment 2, suggesting a toxic effect of cyclodextrin in the last two treatments. Cholesterol incorporation increased the percentage of sperm with intact acrosome after induction of the acrosome reaction. Nevertheless, no reduction was observed in the rates of sperm with intact acrosome after cholesterol removal with the two different cyclodextrin concentrations. Since induced acrosome reaction rate in vitro can be indicative of in vivo fertility, more studies should be performed to enhance the acrosome reaction rate in vitro without reducing plasma membrane integrity |
| Assunto: | Veterinária Eqüino Reprodução Sêmen congelado Espermatozóides Colesterol |
| Idioma: | Português |
| Editor: | Universidade Federal de Minas Gerais |
| Sigla da Instituição: | UFMG |
| Tipo de Acesso: | Acesso Aberto |
| URI: | http://hdl.handle.net/1843/SSLA-7UDHRY |
| Data do documento: | 2-Jul-2007 |
| Aparece nas coleções: | Dissertações de Mestrado |
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