Conjugative plasmids isolated from enteropatogen Shigella sonnei code antagonist substance(s) and antimicrobial resistance

Abstract

A Shigella, um enteropatógeno invasivo, é responsável pela disenteria bacilar ou shigelose, uma doença diarreica grave que afeta principalmente crianças em países subdesenvolvidos. A bactéria expressa diversos fatores de virulência, incluindo substâncias antagonistas e resistência antimicrobiana. Estas substâncias são frequentemente codificadas por genes plasmídicos, que podem ser transferidos por processos de recombinação, como a conjugação bacteriana. O presente estudo foi realizado com o objetivo de determinar se a resistência aos antimicrobianos e a(s) substância(s) antagonista(s) sintetizada(s) por Shigella sleepy SS9 são codificadas por genes plasmidiais. Como revelador de antagonista plasmidial e expressão de receptor, foram utilizadas amostras de S. sonnei SS12 e Escherichia coli ATCC 25922, respectivamente. Para o ensaio de conjugação SS9 e E. coli foi avaliada quanto aos seus perfis de suscetibilidade antimicrobiana. Após seleção antimicrobiana, SS9 e E. coli foram cultivadas separadamente, as culturas ajustadas para escala de McFarland 0,5 e diluídas 1:50. Uma alíquota de cada amostra foi adicionada ao mesmo tubo e o material foi incubado. Em intervalos de tempo predeterminados, as alíquotas foram cultivadas em ágar MacConkey com e sem antimicrobiano. colônias lac + foram avaliadas quanto à expressão de antagonismo. As colônias positivas foram submetidas à extração de plasmídeo e análise por eletroforese. Após cultivar uma amostra transconjugante, o material foi centrifugado e o sobrenadante analisado pelo ensaio antagonista. Também foi realizada análise da curva de crescimento do transconjugante com síntese de substância(s) bioativa(s). Os resultados mostram que a amostra transconjugante passou a abrigar plasmídeos conjugativos com presença de genes que codificam resistência aos antimicrobianos ampicilina e trimetoprima, além da produção de substância(s) antagonista(s). Comprovando a presença de fatores de virulência, que podem ser transferidos por conjugação, do enteropatógeno S. sonnei, que foi reconhecido pela Organização Mundial da Saúde como um dos doze patógenos que necessitam urgentemente do desenvolvimento de novos medicamentos.