Teste de neutralização para toxina épsilon e titulação de toxinas beta e épsilon de Clostridium perfringens tipos C e D em cultura de células

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Universidade Federal de Minas Gerais

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Dissertação de mestrado

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Membros da banca

Zelia Ines Portela Lobato
Luiz Guilherme Dias Heneine
Jenner Karlisson Pimenta dos Reis
Vera Lucia Viegas de Abreu

Resumo

Avaliou-se s sensibilidade das linhagens celulares Madin darby kidney bovine cells (MDBK), Madin darby canine cells (MDCK), African green momkey (VERO), Linfosarcoma de ás toxinas beta e epsilon de Clostridium perfringens tipos C e D respectivamente. Desenvolveram-se e padronizaram-se uma técnica de titulação em linhagens celular e um teste de soroneutralização in vitro para toxina épsilon; A L 929 foi a linhagem celular mais sensível à toxina beta e a MDCK à toxina beta e a MDCK à toxinica épsilon, nas concentrações de 65 a 200 e 1,0 a 3,0 DMM/ml para camundongo (DMNC). Na padronização da técnica de titulação de toxina em células MDCK observou-se correção de 97% entre a DMMc (Dose Mínima Mortal em camundongo) e ECT (Efeito Citotóxico), quando utilizou-se um fator de correção (FC) e ajustou-se a equação matemática para efeito citotóxico (ECT=0,32-00,23xFC). A correlação entre o teste de soroneutalização desenvolvido em células MDCK e o teste padrão em camundongos foi de 99,73%

Abstract

We evaluated the sensitivity s of the cell lines Madin Darby bovine kidney cells (MDBK), Madin darby canine cells (MDCK), African green momkey (VERO), lymphosarcoma ace beta and epsilon toxin of Clostridium perfringens types C and D respectively. Developed and standardized to a titration technique in cell lines and a neutralization test in vitro for epsilon toxin; AL 929 cell line was more sensitive to the toxin and beta toxin to MDCK and MDCK beta epsilon toxin, in concentrations of 65 to 200 and from 1.0 to 3.0 DMM / ml for mice (DMNC). In the standardization of the titration of toxin in MDCK cells was observed correction of 97% between DMMc (minimum lethal dose in mice) and ECT (Cytotoxic Effect), when we used a correction factor (CF) and adjusted the mathematical equation for cytotoxic therapy (ECT XFC = 0,32-00,23). The correlation between test soroneutalização developed in MDCK and pattern in mice was 99.73%

Assunto

Células Cultura e meios de cultura, Vacinas, Clostridium perfringens

Palavras-chave

Soroneutralização, Toxina epsilon, Clostridium perfringens

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