Purification of multifunctional substances active against Shigella sonnei
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Purificação de substâncias multifuncionais ativas contra Shigella sonnei
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Resumo
Shigella is the etiological agent of shigellosis. Antimicrobial peptides and proteins are biologically active substances produced by prokaryotes and eukaryotes that may present antagonistic activity against a wide range of microorganism. In this study, the intracellular extract of a Shigella sonnei isolate was precipitated with 75% ammonium sulfate and purified by sequential chromatography steps using ion exchange, molecular exclusion, and reversed-phase columns. Analysis by mass spectrometry identified three substances with molecular masses of 7.2, 9.2 and 10.7 kDa, active against another Shigella sonnei isolate. The amino acid sequences of the active substances were evaluated with the aid of BLAST - P software. The antagonistic substances were identified, respectively, as 50S ribosomal protein L29 of Escherichia coli, DNA-binding protein HU-beta and ribosome hibernation promoting factor both of Shigella sonnei. Data demonstrated that Shigella sonnei synthesizes three antimicrobial substances that present other classical functions, active against another isolate of the same species.
Abstract
Shigella é o agente etiológico da shigelose. Peptídeos e proteínas antimicrobianos são substâncias biologicamente ativas produzidas por procariontes e eucariotos que podem apresentar atividade antagônica contra uma ampla gama de microrganismos. Neste estudo, o extrato intracelular de um isolado de Shigella sonnei foi precipitado com sulfato de amônio a 75% e purificado por etapas sequenciais de cromatografia usando troca iônica, exclusão molecular e colunas de fase reversa. A análise por espectrometria de massas identificou três substâncias com massas moleculares de 7,2, 9,2 e 10,7 kDa, ativas contra outro isolado de Shigella sonnei. As sequências de aminoácidos das substâncias ativas foram avaliadas com auxílio do software BLAST - P. As substâncias antagonistas foram identificadas, respectivamente, como proteína ribossômica 50S L29 de Escherichia coli, proteína de ligação ao DNA HU-beta e fator promotor de hibernação de ribossomo, ambas de Shigella sonnei. Os dados demonstraram que Shigella sonnei sintetiza três substâncias antimicrobianas que apresentam outras funções clássicas, ativas contra outro isolado da mesma espécie.
Assunto
Shigella sonnei, Disenteria bacilar, Peptídeos catiônicos antimicrobianos
Palavras-chave
Shigella sonnei, Shigellosis, Multifuncional substances, Antimicrobial peptides and proteins
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