O Papel da caspase-8 no controle da infecção causada pela bactéria intracelular Brucella abortus

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Universidade Federal de Minas Gerais

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Tese de doutorado

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The role of caspase-8 in controlling infection caused by the intracellular bacterium Brucella abortus

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Sergio Costa Oliveira
Vasco Ariston de Carvalho Azevedo
Flavio Almeida Amaral
Gilson Costa Macedo
Leonardo Augusto de Almeida

Resumo

A morte celular programada (PCD) é um importante mecanismo da imunidade inata contra patógenos bacterianos. A resposta imune inata da PCD envolve as moléculas caspase-7 e caspase-8, entre outras. Brucella abortus é uma bactéria Gram-negativa que causa uma doença zoonótica denominada brucelose. A resposta imune inata contra esse patógeno envolve ativação de componentes do inflamassoma e indução de piroptose. No entanto, nenhum estudo até agora revelou o papel da caspase-7 ou caspase-8 durante esta infecção bacteriana. Aqui, demonstramos que a caspase-7 é dispensável para o processamento da caspase-1, secreção de IL-1β e morte celular em macrófagos. Animais deficientes em caspase-7 demonstraram controlar a infecção por B. abortus, bem como os camundongos do tipo selvagem. Além disso, abordamos o papel da caspase-8 na ativação do inflamassoma e piroptose durante esta infecção bacteriana. Os macrófagos deficientes em caspase-8 secretaram quantidades reduzidas de IL-1β que se igualam à diminuição da atividade da caspase-1 quando comparados às células do tipo selvagem. Macrófagos deficientes para caspase-8 mostraram liberação reduzida de Lactato desidrogenase (LDH) e da clivagem da gasdermina-D (GSDMD) quando comparados ao tipo selvagem, sugerindo que a caspase-8 pode desempenhar um papel importante na piroptose em resposta à B. abortus. Finalmente, os animais deficientes para caspase-8 demonstraram ser mais suscetíveis à infecção por Brucella quando comparados aos camundongos selvagens. No geral, este estudo contribui para uma melhor compreensão do envolvimento da caspase-7 e caspase-8 na imunidade inata contra a infecção por B. abortus.

Abstract

Programmed cell death (PCD) is an important mechanism of innate immunity against bacterial pathogens. The PCD innate imune response involves the molecules caspase-7 and caspase-8, among others. Brucella abortus is a Gram-negative bacterium that causes a zoonotic disease termed brucellosis. The innate immune response against this pathogen involves activation of inflammasome components and induction of pyroptosis. However, no study has revealed the role of caspase-7 or caspase-8 during this bacterial infection. Here, we demonstrate that caspase-7 is dispensable for caspase-1 processing, IL-1β secretion and cell death in macrophages. Animals deficient in caspase-7 have been shown to control B. abortus infection as well as wild type mice. Furthermore, we addressed the role of caspase-8 in inflammasome activation and pyroptosis during this bacterial infection. Macrophages deficient in caspase-8 secreted reduced amounts of IL-1β that parallels with diminished caspase-1 activity when compared to wild type cells. Additionally, caspase-8 deficient macrophages showed reduced LDH release and gasdermin-D (GSDMD) cleavage when compared to wild type, suggesting that caspase-8 may play an important role in pyroptosis in response to B. abortus. Finally, caspase-8 deficient animals were more susceptible to Brucella infection when compared to wild type mice. Overall, this study contributes to a better understanding of the involvement of caspase-7 and caspase-8 in innate immunity against B. abortus infection.

Assunto

Genética, Caspase 8, Caspase 7, Brucella abortus, Inflamassomos, Piroptose, Imunidade Inata

Palavras-chave

Caspase-8, Caspase-7, Brucella abortus, inflamassoma, piroptose, imunidade inata

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