PCR-RFLP screening of polymorphisms associated with benzimidazole resistance in Necator americanus and Ascaris lumbricoides from different geographical regions in Brazil

Abstract

Ascaris lumbricoides e Necator americanus são parasitas transmitidos pelo solo com distribuição geográfica, e representam algumas das infecções mais comuns e negligenciadas no mundo. Tratamento periódico com administração em massa de medicamentos (MDA) em áreas endêmicas é a ação recomendada pela Organização Mundial da Saúde. No entanto, o MDA pode causar a seleção de subpopulações que possuem a capacidade genética de superar o mecanismo de ação da droga. De fato, mutações no gene da beta-tubulina (códons 167, 198 e 200) estão correlacionados com a resistência ao benzimidazol em nematoides de importância veterinária. Isto é possível que esses SNPs também tenham forte correlação com a resistência ao tratamento no geohelmintos humanos A. lumbricoides, Trichuris trichiura e ancilostomídeos. Aqui, tivemos como objetivo investigar a presença de alguns desses marcadores moleculares canônicos associados à resistência parasitária ao benzimidazol em N. americanus e A. lumbricoides coletados de seis estados brasileiros. Nested-PCR e PCR-RFLP foram usados ​​para detectar mutações nos códons 167 e 198 em 601 ovos individuais de A. lumbricoides coletados de 62 amostras de fezes humanas; no entanto, nenhuma mutação foi encontrada. Os códons 198 e 200 foram testados em 552 N. americanus ovos coletados de 48 pacientes pela mesma metodologia, que apresentaram frequência relativa de 1,4% e 1,1%, respectivamente. A presença desses SNPs em N. americanus ovos é um achado importante, indicando que com alta pressão do medicamento benzimidazol há potencial de resistência ao benzimidazol a ser selecionado neste ancilostomídeo. No entanto, nestas baixas frequências, isso não indica que exista atualmente qualquer resistência ao benzimidazol problema. Este é o primeiro estudo sistemático realizado na América do Sul, e o estudo produziu um panorama das variantes genéticas no gene da beta-tubulina e resistência anti-helmíntica a parasitas transmitidos pelo solo detectados por uma genotipagem simples, rápida e acessível ensaio de ovos individuais