Avaliação da viabilidade de espermatozoides humanos após liofilizaçãos utilizando a técnica de citometria de fluxo
Carregando...
Arquivos
Data
Autor(es)
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Dissertação de mestrado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Resumo
Nas ultimas décadas a preservação de espermatozoides humanos tornou-se cara e difícil. Os bancos de sêmen são fundamentais para promover, em situações especiais a possibilidade de reprodução de casais com dificuldade reprodutiva. No entanto, o uso do nitrogênio líquido leva a um custo elevado de manutenção, risco de contaminação cruzada entre amostras, dificuldades no transporte de alíquotas, além de requerer grandes espaços para armazenamento. A liofilização é uma técnica amplamente utilizada para desidratação de produtos alimentícios, farmacêuticos, produtos biotecnológicos, vacinas, materiais biológicos e diagnósticos. Ela consiste na passagem do material do estado sólido diretamente para o estado gasoso – sublimação - mantendo-se a temperatura suficientemente baixa sob uma baixa pressão e poderia ser uma alternativa mais pratica e de baixo custo para a preservação de espermatozoides.
O objetivo do estudo foi avaliar a viabilidade celular de espermatozoides humanos liofilizados utilizando marcadores de integridade da membrana celular por meio da técnica de citometria de fluxo. Foram consideradas trinta e duas amostras pareadas criopreservadas (grupo controle) e liofilizadas (grupo de estudo). As análises de integridade de membrana foram feitas após o descongelamente e após liofilização. A preservação de integridade da membrana celular foi de 38,7 % para as amostras criopreservadas e 27,6% para as liofilizadas, resultado significativo maior no grupo da criopreservação (p= 0,0004). Existe viabilidade celular de espermatozoides humanos após liofilização utilizando os corantes Anexina V e iodeto de propídio como marcadores indiretos da preservação da integralidade da membrana celular por meio da técnica de citometria de fluxo.
Para utilização rotineira mais estudos são necessários, a fim de otimizar a técnica de liofilização.
Abstract
Assunto
Liofilização, Sêmen, Criopreservação, Citometria de Fluxo, Bancos de Esperma/provisão & distribução, Espermatozoides/efeitos dos fármacos, Membrana Celular, Biomarcadores, Anexina A5
Palavras-chave
Liofilização, Sêmen humano, Criopreservação, Citometria de fluxo