Identificação e purificação de proteínas de Angiostrongylus vasorum (Baillet, 1886) e avaliação da resposta humoral em cães com angiostrongilose.

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Universidade Federal de Minas Gerais

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Tese de doutorado

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Membros da banca

Joaquim Herman Patarroyo Salcedo
Maria Norma Melo
Mucio Flavio Barbosa Ribeiro
Paulo Marcos Zech Coelho

Resumo

Resumo Angiostrongylus vasorum  é um nematóide parasito cujas formas adultas podem ser encontradas no sistema circulatório de cães domésticos e canídeos silvestre s. Cães infectados por A. vasorum podem apresentar diversas manifestações clínicas podendo levar o animal ao óbito. Os testes padronizados para o diagnóstico sorológico utilizando antígeno bruto de parasito adulto de  A. vasorum não são considerados ideais. A identificação e purificação de proteínas espécie-específica é de grande importância para obter maiores índices de sensibilidade e especificidade nos testes de diagnóstico. Neste estudo foram utilizadas amostras de soro de 20 cães infectados experimentalmente com larvas de terceiro  estádio (L3) e amostras de soro de 60 cães infectados naturalmente por outros helmintos gastrointestinais para a separação e identificação das proteínas espécie-especificas . Immunoblotting revelou reatividade para. IgG, IgM, IgA e IgE contra proteínas de A. vasorum  com peso molecular de 18 a 209 KDa. As proteínas de 51,63,92 e 209 KDa não foram reconhecidas por anticorpos IgG presentes no soro de cães naturalmente infectados por outros helmintos. Anticorpos específicos anti-A. vasorum foram adsorvidos por imunoafinidade e acoplados em resima Sepharose proteína A para a purificação de proteínas específicas. A proteína de 51 KDa foi obtida. O teste de Elisa demonstrou alta reatividade espécie-específicas com soro de cães experimentalmente  infectados por A. vasorum obtendo um índice de 100% de sensibilidade e especificidade.

Abstract

Assunto

Imunodiagnóstico, Angiostrongylus vasorum, Cromatografia de afinidade

Palavras-chave

Angiostrongylus vasorum, cromatografia de imunoafinidade angiostrongilose e cães

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