Avaliação da resposta de macrófagos inflamatórios frente aos cimentos biocerâmico.
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Dissertação de mestrado
Título alternativo
Evaluation of the inflammatory macrophagus response in front of bioceramic cements
Primeiro orientador
Membros da banca
Gil Moreira Júnior
Resumo
As propriedades e a composição dos cimentos endodônticos podem influenciar nas reações inflamatórias perirradiculares e comprometer o sucesso do tratamento endodôntico. Os macrófagos estão presentes no infiltrado inflamatório periapical, envolvidos na eliminação e controle microbiano nesta região. Este estudo avaliou a atividade de viabilidade celular, aderência, fagocitose da levedura S. boulardii, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), óxido nítrico (NO), e das citocinas (TNF- α e TGF-β) por macrófagos peritoneais murinos de perfil pró-inflamatório (M1) e anti-inflamatório (M2) obtidos de camundongos C57BL/6 e BALB/c, respectivamente. Os macrófagos foram obtidos e a suspensão celular foi colocada em contato com capilares contendo ou não os cimentos Endosequence BC Sealer (BC), Sealer PLus BC (MK), Bio-c Sealer (Ang) e MTA. Mensurou-se a viabilidade celular pelos métodos da exclusão do azul de tripan e por MTT nos tempos 24, 48 e 72 horas. No primeiro ensaio, foi encontrada viabilidade celular semelhante entre os biocerâmicos e o MTA nos tempos testados; no entanto, houve diferença significativa em 72h entre BC e controle (capilar vazio); para o MTT houve diferença com o controle entre: Ang (24h), BC e MK (48h) para M1; para M2, MK (24h), Ang (48h) e BC, Ang, MTA (72h) (p<0,05). Nos ensaios de aderência e de fagocitose não houve diferença significativa para os materiais testados em ambos os subtipos de macrófago. Em relação à produção de ROS, houve uma maior expressão para M1 em comparação com M2. Na ausência do Zimosan não houve produção significativa entre os cimentos, para ambos os macrófagos. Na presença do Zimosan A, o cimento MK apresentou maior produção que os grupos tratados com Ang e MTA, e controle (p<0,05) para macrófago M1. No ensaio de detecção de NO, na presença do estímulo, todos os cimentos testados apresentaram diferenças significativas com o controle, para o macrófago M1. Na dosagem de TNF houve diferença significativa somente para macrófagos M1, com uma maior produção pelo cimento Endosequence BC, mesmo sem estímulo; sobretudo, quando estimulados com IFN-γ, BC apresentou maior produção que os grupos tratados MK e Ang; e, todos os grupos apresentaram diferenças em relação ao controle. A dosagem de TGF- β não apresentou diferenças para os grupos tratados na presença ou ausência do estímulo. Concluiu-se que a composição dos biocerâmicos, à base de silicato de cálcio, semelhante à do MTA, permitiu que os biocerâmicos não interferissem nas respostas de macrófagos de ambas as linhagens testadas.
Abstract
The properties and compositions of endodontic sealers may influence the
periradicular inflammatory reactions and compromise the success of endodontic
treatment. Macrophages are present in the periapical inflammatory infiltrate, being
involved in the microbial clearance in this region. This study evaluated the cell
viability, adhesion, phagocytosis of S. boulardii, production of reactive oxigen species
(ROS) and nitrite oxide (NO) and cytokines (TNF and TGF-β) by murine peritoneal
macrophages of pro-inflammatory (M1) and anti-inflammatory (M2) profiles obtained
from C57BL / 6 and BALB / c mice, respectively. Macrophages were obtained and
the cell suspension was placed in contact with capillaries containing or not the
sealers Endosequence BC Sealer (BC), Sealer PLus BC (MK), Bio-c Sealer (Ang) e
MTA. Cell viability was measured by the methods of tripan blue exclusion and by
MTT at times 24, 48 and 72 hours. In the first assay, similar cell viability was found
between the bioceramic and the MTA in the tested times; However, there was a
significant difference in 72h between BC and control (empty capillary); For the MTT
there was a difference with the control between: Ang (24h), BC e MK (48h) para M1;
para M2, MK (24h), Ang (48h) e BC, Ang, MTA (72h) (p<0,05). n the adherence and
phagocytosis assays there was no significant difference for the materials tested in
both macrophage subtypes. Regarding the production of ROS, there was a greater
expression for M1 compared to M2. In the absence of Zymosan there was no
significant production between the sealers for both macrophages. In the presence of
Zimosan A, the MK cement presented higher production than the groups treated with
Ang and MTA, and control (p <0.05) for M1 macrophages. n the NO detection assay,
in the presence of the stimulus, all the sealers tested showed significant differences
with the control, for the M1 macrophage. In the TNF there was only difference for M1,
with a higher production by the Endosequence BC even without stimulus, when
stimulated with IFN-γ, BC showed higher production than the treated groups MK and
Ang; and all groups showed differences in relation to control. The TGF-β dosage did
not present difference for the groups treated in the presence or absence of the
stimulus. It was concluded that the calcium silicate composition, similar to that of
MTA, allowed the bioceramics to not interfere in the macrophages responses of both
tested strains.
Assunto
Endodontia, Cimentos dentários, Obturação do canal radicular, Macrófagos
Palavras-chave
Macrófago., Obturação do canal radicular, Cimentos dentários