A urine-based ELISA with recombinant non-glycosylated SARS-CoV-2 spike protein for detecting anti-SARS-CoV-2 spike antibodies

Abstract

Ensaios sorológicos têm sido amplamente utilizados para detectar anticorpos anti-SARS-CoV-2, que são gerados a partir de exposição prévia ao vírus ou após vacinação. A presença de anticorpos anti-SARS-CoV-2 Nucleocapsídeo foi relatada recentemente na urina de pacientes usando a plataforma ELISA interna baseada em urina, permitindo uma maneira não invasiva de coletar amostras clínicas e avaliar a conversão imunológica. No estudo atual, avaliamos e validamos outro ELISA interno baseado em urina para a detecção de anticorpos anti-SARS-CoV-2 Spike. Três proteínas SARS-CoV-2 Spike recombinantes parciais compreendendo o Domínio de Ligação ao Receptor, expressas em sistemas eucarióticos ou procarióticos, foram testadas em uma plataforma ELISA contra um painel de mais de 140 amostras de urina e soro pareadas coletadas de 106 pacientes confirmados positivos para SARS-CoV-2 por qRT-PCR. As principais descobertas do nosso estudo foram que os anticorpos anti-SARS-CoV-2 Spike puderam ser detectados em amostras de urina e que a expressão procariótica da proteína rSARS-CoV-2 Spike não foi uma barreira para obter eficiência sorológica relativamente alta para o ensaio baseado em urina. Assim, o uso de um ensaio ELISA baseado em urina com proteínas parciais rSARS-CoV-2 Spike, expressas em um sistema procariótico, pode ser considerado uma ferramenta conveniente para triagem da presença de anticorpos anti-SARS-CoV-2 Spike e superar as dificuldades decorrentes da coleta de amostras e da necessidade de proteínas recombinantes produzidas com sistemas de expressão eucariótica.