Vacinação experimental de bovinos com peptídeo sintético de RAP-1 de Babesia bovis: avaliação de parâmetros parasitológicos e imunológicos com ênfase na imunidade celular e humoral
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Tese de doutorado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Olindo Assis Martins Filho
Joaquim Herman Patarroyo Salcedo
Lygia Maria Friche Passos
Paulo Roberto de Oliveira
Joaquim Herman Patarroyo Salcedo
Lygia Maria Friche Passos
Paulo Roberto de Oliveira
Resumo
Para a avaliação de eficácia imunogênica do peptídeo sintético de RAP-1de B.bovis,15 bovinos com idades superiores a 12 meses, livres de hemoparasitores foram mantidos em isolamento para hemoparasitores e separados em três grupos de cinco animais.Os bovinos do Grupo Peptídeo receberam, por via subcutânea, nos dias D-90,D-60 e D-30,dois mg do paptideo emulsionado em Saponina.Os do grupo Saponina receberam adjuvantes saponina e os animais do grupo controle receberam soro fisiológico, sob o mesmo esquema do grupo peptídeo.Trinta dias após a ultima inoculação, os animais foram desafiados com 5 x 108 Hemácias parasitadas com B.bovina virulenta. Amostras de Sangue e Soro foram colhidos para a realização do estudo cinético de parâmetros parasitológicos e imunológicos nos estudos parasitológicos realizados por esfregaço sanguíneo de ponto a de orelha e por citometria de fluxo,com marcação com hidroetidina, observou-se que a citometria de fluxo permitiu a datação de B.bovis a partir do segundo dia após o desafio e manteve-se positiva por todo o experimento. Quanto ao esfregaço de ponta de orelha, a detecção do parasito se deu a partir do terceiro dia mas fois achado inconstante. A avaliação imunológica da resposta imune celular foi realizada no contexto ex vivo e in vitro, por exemplo pór intermédio da imunofenotipagem de leucócitos de sangue periféricos, com anticorpos monoclonais bovinos CD4,CD8 marcados com FITC e CD21 não marcado. A reposta imune humoral foi realizada por meio do teste imunoenzimático ELISA. A analise do resultados revelou que o grupo Peotideo desenvolveu respostas imune protetora precoce envolvendo linfócitos T, principalmente TCD4*,células B produtoras de anticorpos e células NTNB. O grupo controle foi capaz de montar uma respostas antígeno especifica pôs-desafio envolvendo células B, mas não apresentou habilidade de recrutar células T CD4, o que provocou a morte de três animais.O aumento de linfócitos T CD4, nesse grupo,so foi observado tardiamente. O gupo saponina apresentou percentuais mais baixos de linfócitos T e B, e de IgG durante todo o experimento ,porem , alto percentual de células não T não B(NTNB). A morte dos animais desse grupo provavelmente ocorreu devido a um resposta imune exacerbada .Aresposta linfoproliferativa in vitro na presença do mitogeno (Com-A) mostrou-se diminuída em todos os animais inoculados com amostra patogenicade B.bovis, enquanto que a resposta antígeno especifica apresentou-se elevada, somente no Grupo Peptideo. A partir dessas informações pode-se considerar que a imunização com o paptideo sintético de RAP-1de B.bovis foi capaz de reduzir a taxa de mortalidade,no grupo controle,de 60% para 20%,nos animais imunizados e desenvolver uma resposta antígeno especifica envolvendo resposta celular,humoral e inata.
Abstract
Assunto
Imunologia, Bovino Doenças, Babesiose em bovino Vacina, Imunidade celular
Palavras-chave
Imunologia, Imunidade celular, RAP-1, Peptídeo, Citometria de fluxo, Imunidade humoral, Babesia bovis, sintético, Hidroetidina