Impact of reactive oxygen species (ROS) on the control of parasite loads and inflammation in Leishmania amazonensis infection

Abstract

Introdução: Espécies reativas de oxigênio (ROS) protegem o hospedeiro contra um grande número de microrganismos patogênicos. As ROS têm diferentes efeitos sobre os parasitas do gênero Leishmania: alguns parasitas são suscetíveis à sua ação, enquanto outros parecem ser resistentes. O papel das ROS na infecção por L. amazonensis in vivo não foi abordado até o momento. Métodos: Neste estudo, camundongos C57BL/6 wild-type (WT) e camundongos geneticamente deficientes na produção de ROS por fagócitos (gp91phox−/−) foram infectados com promastigotas metacíclicos de L. amazonensis para avaliar o efeito das ERO no controle do parasita. Citocinas inflamatórias, carga parasitária e atividade da mieloperoxidase (MPO) foram avaliadas. Paralelamente, a infecção in vitro de macrófagos peritoneais foi avaliada para determinar a morte do parasita, produção de citocinas, NO e ROS. Resultados: Os resultados in vitro mostram indução da produção de ROS por macrófagos peritoneais infectados, mas nenhum efeito na eliminação do parasita. Além disso, as ROS não parecem ser importantes para matar o parasita in vivo, mas controlam o tamanho das lesões nos estágios iniciais da infecção. A produção de IFN-γ, TNF-α e IL-10 não diferiu entre as linhagens de camundongos. O ensaio de mieloperoxidase mostrou aumento do influxo de neutrófilos 6 h e 72 h pós-infecção em camundongos gp91phox−/−, indicando uma maior resposta inflamatória em gp91phox−/− mesmo em momentos iniciais. Em pontos de tempo posteriores, os números de neutrófilos nas lesões correlacionaram-se com o tamanho da lesão: lesões maiores em gp91phox−/− em tempos iniciais da infecção corresponderam a infiltrados neutrófilos maiores, enquanto lesões maiores em camundongos WT nos pontos posteriores da infecção também exibiram números maiores de neutrófilos . Conclusão: As ROS não parecem ser importantes na morte de L. amazonensis, mas regulam a resposta inflamatória provavelmente pelo controle do número de neutrófilos nas lesões.