Avaliação de soros hiperimunes anti-Brucella para detecção de Brucella spp. por imunoistoquímica
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Dissertação de mestrado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Tayse Domingues de Souza
Wagner Luiz Tafuri
Wagner Luiz Tafuri
Resumo
Brucelose é uma importante doença infectocontagiosa zoonótica no cenário mundial de curso
crônico que causa principalmente alterações reprodutivas em animais domésticos e silvestres.
As identificações de animais infectados ocorrem por meio de avaliação clínica, associado a
testes diagnóstico, que podem ser provas diretas ou indiretas. O presente estudo teve como
objetivo avaliar a eficácia de quatro diferentes soros hiperimunes de coelho anti-Brucella spp.
em detectar por IHQ antígenos de Brucella spp. em tecidos parafinizados de animais
infectados experimentalmente ou naturalmente com B. abortus, B.canis e B. ovis. A produção
dos soros hiperimunes partiu da imunização de quatro coelhas, com uma espécie Brucella
inativada por radiação gamma, ou com proteína BP26 recombinante. O teste de ELISA foi
usado para determinar a soro conversão das coelhas ao imunógeno e reação cruzada dos soros
hiperimunes aos antígenos. A imunoistoquímica utilizou os soros hiperimunes em três
diluições (1/100, 1/500 e 1/1000) para determinar a diluição ideal de uso e reação cruzada
entre eles. Observou-se que os anticorpos anti-B. abortus e anti-B. ovis detectaram maior
número de casos de animais acometidos pela brucelose, anti-B. canis apresentou menor
capacidade de detecção e soro anti-BP26 não identificou nenhum animal infectado. A
imunização de coelhos com Brucella sp inativada por radiação produziu soros hiperimunes
anti-Brucella eficazes na identificação do antígeno de Brucella na lesão, mas o soro
hiperimune anti-BP26 não foi capaz de identificar o antígeno na lesão.
Abstract
Brucellosis is an important zoonotic infectious disease with worldwide distribution. It has a
chronic course that mainly causes reproductive changes in domestic and wild animals.
Identification of infected animals occurs through clinical evaluation, associated with direct or
indirect diagnostic tests. The present study aimed to evaluate the efficacy of four different
rabbit hyperimmune anti-Brucella sera for detection of Brucella spp. antigens in paraffinized
tissues of animals experimentally or naturally infected with B. abortus, B. canis, or B. ovis.
The hyperimmune sera were produced by immunizing four rabbits, with a Brucella spp.
inactivated by gamma radiation, or with a recombinant BP26 protein. ELISA test was used to
determine the serum conversion of the rabbits to the immunization and cross-reactivity of the
hyperimmune sera to the antigens. Immunohistochemistry was performed with three dilutions
(1/100, 1/500, and 1/1000) of the hyperimmune sera to determine the ideal dilution for use
and cross-reactivity. It was observed that anti-B. abortus and anti-B. ovis antibodies detected a
greater number of cases of animals affected by brucellosis, anti-B. canis antibody showed
lower detection and anti-BP26 serum did not identify any infected animal. Immunization of
rabbits with radiation inactivated Brucella spp. produced anti-Brucella hyperimmune sera
effective in identifying the Brucella antigens in the lesion, but the anti-BP26 hyperimmune
serum was not able to identify those antigens.
Assunto
Patologia, Brucelose, Imuno-Histoquímica
Palavras-chave
brucelose, histopatologia, imunodetecção, anticorpo policlonal
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