Produção de uma proteína quimera usada como alvo vacinal frente à ascaridíase e transformação genética de plantas (Arabidopsis thaliana e Solanum lycopersicum cultivar Micro-Tom) com o gene vacinal
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Tese de doutorado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Ana Paula Peconick
Jacqueline Araújo Fiúza
Vitor Luis Tenório Mati
Ricardo Nascimento Araujo
Jacqueline Araújo Fiúza
Vitor Luis Tenório Mati
Ricardo Nascimento Araujo
Resumo
Ascaris lumbricoides e Ascaris suum são parasitos causadores da ascaridíase, doença
que leva a quadros de desnutrição e tem grande impacto especialmente no desenvolvimento de
crianças infectadas. Ambos os parasitos são capazes de infectar humanos e são por vezes
considerados uma única espécie. Estima-se que 800 milhões de pessoas estão infectadas por
A. lumbricoides e as medidas profiláticas que visam o controle do mesmo são limitadas,
principalmente em regiões endêmicas. Usadas há séculos, as vacinas, são uma estratégia de
intervenção que possuem melhor custo- benefício, sendo as recombinantes, uma das mais
promissoras contra uma gama de patógenos e tumores. A produção de vacinas em plantas tem
sido estudada há algum tempo, apresentando resultados positivos e grandes vantagens. Assim
sendo, o presente trabalho visou a produção de uma vacina quimera e linhagens transgênicas de
Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom e Arabidopsis thaliana expressando de forma ectópica
a sequência do antígeno vacinal contra A. suum. Para tanto, foram selecionados epítopos para a
construção da proteína quimera. Fêmeas de camundongos BALB/c foram imunizadas e pode-
se constatar que animais imunizados com a proteína quimera juntamente com MPLA
(Formulação Vacinal) apresentaram uma redução de cerca de 73,54% na carga parasitária em
relação ao grupo controle imunizado com PBS. Em análise histopatológica, foi possível
verificar uma redução da inflamação no pulmão e do espessamento dos septos no grupo
imunizado apenas com a proteína quimera bem como no imunizado com a Formulação Vacinal.
O grupo imunizado com a Formulação Vacinal apresentou, ainda, maior produção de IgG do
que os demais grupos.Em ELISA foi verificado o reconhecimento da proteína quimera por soro
de animais infectados com A. suum. Foi estabelecido um protocolo para a imunização de
camundongos com a proteína quimera por via oral, bem como verificada a bioacessibilidade da
mesma em digestão in vitro. Plantas de Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom e
Arabidopsis thaliana foram transformadas geneticamente, obtendo plantas transgênicas na
geração T1, com a inserção do gene da proteína quimera, confirmada por PCR e seleção por
antibiótico. Por conseguinte, pode-se inferir que a proteína quimera é um bom alvo vacinal
frente à infecção por A. suum, sendo seu uso benéfico para o controle da ascaridíase e que a
inserção do gene do imunógeno em plantas pode vir a ser um caminho para a produção de
vacinas.
Abstract
Assunto
Parasitologia, Ascaris, Vacinas
Palavras-chave
Ascaris spp., Vacina recombinante, Vacina oral, Vacina comestível