The role of LuloPAT amino acid/proton symporters in midgut alkalinization in the sandfly Lutzomyia longipalpis (Diptera – Psychodidae)

Abstract

Em fêmeas de Lutzomyia longipalpis, que são os principais vetores de Leishmania infantum nas Américas, a hematofagia é crucial para o desenvolvimento ovariano. O controle do pH no intestino médio durante a digestão do sangue é importante para o funcionamento das enzimas digestivas, que liberam aminoácidos no compartimento luminal que são então transportado através dos enterócitos para a hemolinfa para entrega ao ovário e outros órgãos. No presente trabalho, investigamos sistemas de transporte conhecidos como LuloPATs que estão presentes no intestino médio de L. longipalpis, mas não em outros órgãos. Esses transportadores realizam simporte de aminoácidos com íons H+, e um deles (LuloPAT1) é ortólogo a um transportador descrito em Aedes aegypti. De acordo com nossos resultados, a transcrição os níveis de LuloPAT1 aumentaram significativamente imediatamente após uma refeição de sangue. Com base na variação do fluorescência da fluoresceína com o pH do meio, desenvolvemos uma técnica que mostra a acidificação da no citoplasma das células intestinais quando os aminoácidos são cotransportados com H+ do lúmen para os enterócitos. Dentro Em nossos experimentos, os intestinos médios dos flebotomíneos foram dissecados e abertos longitudinalmente para que fossem adicionados aminoácidos. ácidos podem entrar nos enterócitos através do lúmen (portadores de PAT são apicais). Os transportadores LuloPAT1 fazem parte de um complexo de mecanismos que atuam sinergicamente para promover a alcalinização intestinal assim que a ingestão de sangue pelo ocorre o vetor. Em intestinos dissecados, mas não abertos longitudinalmente, os aminoácidos adicionados só podem entrar através na região basolateral dos enterócitos. No entanto, a alcalinização do lúmen foi observada devido à entrada de alguns aminoácidos no citoplasma dos enterócitos desencadeia um mecanismo de alcalinização luminal independente LuloPATs. Esses achados fornecem novas perspectivas que permitirão a caracterização do conjunto de sinais vias envolvidas na regulação do pH no intestino médio de L. longipalpis.