Identificação do padrão de metilação nos genes IFN- e IL-10 em polpa dental humana
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Dissertação de mestrado
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Primeiro orientador
Membros da banca
Taia Maria Berto Rezende
André Luiz Sena Guimarães
André Luiz Sena Guimarães
Resumo
Entre os mecanismos com acoes efetoras e moduladoras da resposta imune pulpar encontram-se as citocinas. Sua regulacao depende de diversos fatores, dentre eles, os fatores epigeneticos, considerados mecanismos de controle da transcricao genica. Estes mecanismos permitem que genes sejam silenciados ou ativados, sem quehaja alteracao na sequencia de nucleotideos do DNA. O processo de metilacao do DNA gera uma alteracao conformacional que impede a transcricao. O padrao de metilacao dos genes tem sido avaliado em varios tecidos na presenca ou ausencia de inflamacao. A polpa dental, devido a suas caracteristicas, pode apresentar particularidades quanto aesse padrao. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a ocorrencia de metilacao nos genes das citocinas IFN-Á e IL-10. Dois grupos foram selecionados: controle (sem inflamacao) - polpas recuperadas de dentes inclusos . e, caso (inflamado) . polpas recuperadas de dentes cariados. O DNA foi extraido, tratado com bissulfito de sodio, e ametilacao foi analisada por MSP (IFN-Á) ou sequenciamento (IL-10). Observaram-se metilacao parcial no grupo caso e metilacao total no grupo controle (p< 0,005) no gene do IFN-Á. Quanto a IL-10, metilacao parcial e total foram observadas em ambos os grupos. Concluiu-se que mecanismos epigeneticos podem estar relacionados a modulacao da resposta inflamatoria no tecido pulpar.
Abstract
DNA methylation is characterized by addition of methyl groups in cytosines within CpG islands. Unmethylated islands are related with transcriptionally active structure, whereas methylated DNA recruits methyl-binding proteins that promotes chromatin compactation. Although epigenetic events can influence the expression of cytokines, it has not been already investigated in dental pulp. The purpose of the presentstudy was to evaluate the methylation status of IFN- gene in human dental pulp affected by inflammation compared with pulp tissue cells of impacted molar teeth. The MSP was used to verify the DNA methylation status. While total methylation was only observed in some samples of the normal dental pulp tissues, partial methylation was found in most of the cases of inflamed pulp tissues. In conclusion, the present studygives the first evidence of the possible participation of epigenetic events in inflamed dental pulp.
Assunto
Interleucina-10, Interferon gama, Polpa dentária, Metilação, Pulpite
Palavras-chave
Interleucina-10, Metilação polpa dentária, inflamação, interferon