Purificação de MPB70 recombinante e aplicação em testes de diagnóstico para a tuberculose bovina

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dc.creatorElizabeth Fonseca dos Reis
dc.date.accessioned2019-08-14T07:39:09Z
dc.date.accessioned2025-09-08T23:00:02Z
dc.date.available2019-08-14T07:39:09Z
dc.date.issued2004-06-02
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/1843/BUOS-8FULST
dc.languagePortuguês
dc.publisherUniversidade Federal de Minas Gerais
dc.rightsAcesso Aberto
dc.subjectBovino Doenças
dc.subjectTuberculose em bovino Diagnóstico
dc.subjectTeste tuberculínico
dc.subject.otherFTIR
dc.subject.otherTuberculose bovina
dc.subject.otherHidrogel
dc.subject.otherMPB70 recombinante
dc.subject.otherdiagnosticoELISA
dc.subject.othercaracterização espectroscópica
dc.titlePurificação de MPB70 recombinante e aplicação em testes de diagnóstico para a tuberculose bovina
dc.typeTese de doutorado
local.contributor.advisor1Zelia Ines Portela Lobato
local.contributor.referee1Andrey Pereira Lage
local.contributor.referee1Herman Sander Mansur
local.contributor.referee1Luiz Guilherme Dias Heneine
local.contributor.referee1Jose Maciel Rodrigues Junior
local.description.resumoMycobacterium bovis AN5.O fragmento amplificado dói usado em sistema de expressão empregando procariotos.No ELISA indireto desenvolvido utilizando-se a MPB70r produzida na fase solida foi verificada reação com anticorpo monocional anti-MPB70 e com soros de bovinos reagentes a tuberculinização, não reagindo com soros bovinos com paratuberculose e bovinoss sensibilizados com Myconbacterium avium.Os resultados obtidos foram comparados aos resultados da tuberculinizacao e mostraram especificidades 99% e sensibilidade relativa baixa,pois o tipo de respostas imunológica medida pelos dois testes é diferente.Porém a sensibilidade do teste aumentou 92 % quando o mesmo foi utilizada em paralelo com a tuberculinização sem alteração da especificidade.A fim de produzir materiais alternativos como suporte para ensaios imunológicos foram sintetizados e caracterizados quimicamente por espectroscopia na região do infravermelho por transformada de Fourier(FTIR) hidrogéis com base polimérica de álcool polivilico(PVA) /Glutaraldeido(GA) e híbridos contendo GA e/ou tetraetil ortossilicato (TEOS) adsorvidos ou não da proteína MPB70 recombinante (MPB70r).Os espectros FTIR dos dispositivos mostraram as regiões de absorção das ligações químicas especificas do PVA e do GA confirmando a formação do hidrogél de PVA + GA.As ligações químicas que confirmaram a formação dos híbridos PVA+TEOS e PVA +GA_TEOS estavam presentes nos picos referentes às regiões de absorção das ligações dos grupos característicos do PVA,GA e do TEOS.Já nos dispositivos que sofreram adsorção direta da MPB70r foram identificados por /FTIR os agrupamentos específicos e os picos referentes às ligações das amidas 1,2 e 3,ligações estas normalmente encontradas nas estruturas das proteínas ,confirmando que houve adsorção protéica nos dispositivos.Com os dispositivos adsorvidos com a MPB70r foi realizado um teste de imunoensaio,ELISA,para a detecção de anticorpos contra esta proteína em soros de bovinos reagente a prova de tuberculinização .Simultaneamente o mesmo ensaio foi realizado em placas de polietileno,próprias para ensaios de ELIZA,a mesma proteína foi adsorvida e os mesmos soros testados.
local.publisher.initialsUFMG

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