Tecnologia de phage display aplicada para o controle da leishmaniose tegumentar: identificação de biomarcardores e aplicação como vacinas contra a doença
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Tese de doutorado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Dra Ana Thereza Chaves
Mario da Silva Giusta
Patrícia Aparecida Fernandes Ribeiro
Mario da Silva Giusta
Patrícia Aparecida Fernandes Ribeiro
Resumo
As leishmanioses compreendem um espectro de doenças encontradas em regiões tropicais
e subtropicais do mundo, e que podem causar elevada mortalidade e morbidade. A
prevenção e o controle da doença são importantes, porém, apresentam limitações devido à
dificuldade na interrupção do ciclo do vetor, à toxicidade dos medicamentos e à ausência de
vacinas efetivas. Portanto, a melhoria da profilaxia contra a doença é uma necessidade, e a
utilização de novas tecnologias, como Phage Display, pode proporcionar o alcance de tais
objetivos. No presente estudo, bacteriófagos expressando mimotopos específicos para
anticorpos IgG de pacientes com leishmaniose tegumentar (LT) foram selecionados e
testados em experimentos in vitro para a estimulação de células mononucleares do sangue
periférico (PBMCs) de pacientes com LT tratados e não tratados, bem como de indivíduos
sadios, a fim de se avaliar a produção de interferon-γ (IFN-γ) e interleucina-4 (IL-4) nas
culturas in vitro e definir os melhores candidatos a serem testados em modelo murino. Os
clones foram avaliados quanto à seletividade e especificidade, sendo que os clones A4 e A8
foram selecionados por apresentar maiores valores e utilizados em protocolos de
imunização de camundongos BALB/c para avaliação da proteção induzida contra a infecção
com Leishmania amazonensis. Os resultados mostraram uma resposta Th1 polarizada
gerada após a vacinação com os clones, baseando-se em níveis significativamente maiores
de IFN-γ, IL-2, IL-12, fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e fator estimulante de colônias de
granulócitos-macrófagos (GM-CSF), além da produção de anticorpos do isotipo IgG2a. Os
camundongos vacinados apresentaram reduções significativas da carga parasitária no
tecido infectado e órgãos avaliados, quando comparados aos grupos controle. Em
conclusão, a tecnologia de phage display foi utilizada para identificar novos clones de fagos
expressando peptídeos de interesse, que foram capazes de induzir um perfil de resposta
Th1 em PBMCs de pacientes com LT e indivíduos saudáveis, bem como eficazes em
induzir proteção em camuindongos BALB/c contra a infecção causada por L. amazonensis.
Abstract
Assunto
Leishmaniose Cutânea, Técnicas de Visualização da Superfície Celular, Imunidade nas mucosas, Leucócitos Mononucleares, Vacinas, Dissertação Acadêmica
Palavras-chave
Leishmaniose tegumentar, phage display, resposta imune, células mononucleares do sangue periférico, vacina, mimotopos