Parâmetros biológicos de Amblyomma sculptum alimentados em diferentes linhagens de camundongos e desenvolvimento de resposta imune antissaliva
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
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Tipo
Dissertação de mestrado
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Primeiro orientador
Membros da banca
Gabriel Cerqueira Alves Costa
Júlia Angélica Gonçalves da Silveira
Júlia Angélica Gonçalves da Silveira
Resumo
Amblyomma sculptum, carrapato da família Ixodidae, possui como principais hospedeiros os equinos, as capivaras e as antas. Estes hospedeiros não desenvolvem uma imunidade efetiva contra o carrapato e podem apresentar altas cargas parasitárias. Tendo em vista a necessidade de desenvolvimento de novas formas de combate aos carrapatos, a manutenção de colônias de A. sculptum em laboratório com uma quantidade suficiente de espécimes para a realização de experimentos é essencial. Entretanto, o uso de camundongos para a manutenção de colônias de A. sculptum ainda é pouco descrito na literatura. No presente estudo, o objetivo principal foi descrever os parâmetros biológicos do carrapato A. sculptum alimentado em diferentes linhagens de camundongos e avaliar o desenvolvimento de resposta imune pelos hospedeiros. Para isso, a alimentação de A. sculptum foi feita em camundongos C57BL/6, Swiss, BALB/c e BALB/c knockout para o receptor ST2 (kST2). Ninfas do carrapato-estrela também foram alimentadas em diferentes densidades parasitárias e em sucessivas infestações. O sangue de camundongos infestados foi coletado para avaliação de anticorpos. Os resultados mostraram que camundongos das linhagens BALB/c, C57BL/6 e Swiss podem ser utilizados para manter uma colônia de larvas e ninfas de A. sculptum em laboratório. Entretanto, as ninfas alimentadas em camundongos Swiss apresentaram peso após alimentação menor, 13,1 ± 4,3 mg, e tempo médio de muda maior, 17,1 ± 1,4 dias. As ninfas alimentadas em camundongos BALB/c knockout para o receptor ST2 (kST2) realizaram o repasto sanguíneo com eficiência semelhante às ninfas alimentadas em camundongos BALB/c. Porém, demoraram mais tempo para se alimentarem, 5,3 ± 1,4 dias. Ninfas de A. sculptum foram mais eficientes quando alimentadas em densidades parasitárias de 10 ninfas/camundongo. Quando cinco ninfas foram alimentadas no mesmo local no camundongo, o peso após a alimentação foi significativamente menor, 12,9 ± 5,3 mg em camundongos BALB/c e 12,9 ± 3,9 mg em camundongos kST2. As ninfas realizaram com sucesso a hematofagia nas três infestações sucessivas em camundongos BALB/c, kST2 e Swiss demonstrando que esses camundongos não desenvolveram uma resistência adquirida. O tempo de alimentação foi maior quando ninfas alimentaram em camundongos das linhagens BALB/c e kST2 previamente infestados por carrapatos, 7,5 ± 1,0 e 6,5 ± 1,3 dias, respectivamente. Já na linhagem Swiss, o tempo de alimentação e o tempo de muda foram menores, 4,7 ± 1,2 e 14,3 ± 0,4 dias, respectivamente. O soro dos camundongos Swiss parasitados apresentou anticorpos antissaliva crescentes após uma terceira infestação. Os anticorpos presentes no soro dos camundongos Swiss reconheceram, através de Western Blot, moléculas do extrato de glândula e da saliva do carrapato, essa última representada por duas bandas, o que indica que a saliva tem poucas proteínas imunogênicas. Nosso trabalho mostrou que camundongos são bons hospedeiros para o carrapato A. sculptum, podendo ser usados por até três infestações sem desenvolverem imunidade efetiva contra o parasitismo.
Abstract
Amblyomma sculptum, a tick of the family Ixodidae, has as main hosts equines,
capybaras, and tapirs. These hosts do not develop effective immunity against the tick
and may have high parasitic loads. Because of the need to develop new ways of
combating ticks, the maintenance of A. sculptum colony in the laboratory with a
sufficient number of specimens to carry out experiments is essential. However, the use
of mice for the maintenance of A. sculptum colonies is still poorly described in the
literature. In the present study, the main objective was to describe the biological
parameters of the tick A. sculptum fed on different strains of mice and to evaluate the
development of immune response by the hosts. For this, A. sculptum was fed on
C57BL/6, Swiss, BALB/c, and BALB/c knockout mice for the ST2 (kST2) receptor. Star
tick nymphs were also fed at different parasitic densities and successive infestations.
Blood from infested mice was collected for antibody assessment. The results showed
that BALB/c, C57BL/6, and Swiss mice can be used to maintain a colony of A. sculptum
larvae and nymphs in the laboratory. However, nymphs fed on Swiss mice had lower
weight after feeding, 13.1 ± 4.3 mg, and longer mean molting time, 17.1 ± 1.4 days.
Nymphs fed on BALB/c knockout mice to the ST2 receptor (kST2) performed blood
meal with efficiency similar to nymphs fed on BALB/c mice. However, they took longer
to feed, 5.3 ± 1.4 days. A. sculptum nymphs were more efficient when fed at parasitic
densities of 10 nymphs/mice. When five nymphs were fed at the same location in the
mouse, the weight after feeding was significantly lower, 12.9 ± 5.3 mg in BALB/c mice
and 12.9 ± 3.9 mg in kST2 mice. The nymphs successfully performed hematophagy
on the three successive infestations in BALB/c, kST2, and Swiss mice demonstrating
that these mice did not develop acquired resistance. Feeding time was longer when
nymphs fed on mice of the BALB/c and kST2 strains previously infested with ticks, 7.5
± 1.0 and 6.5 ± 1.3 days, respectively. In the Swiss line, the feeding time and the
seedling time were shorter, 4.7 ± 1.2 and 14.3 ± 0.4 days, respectively. The serum of
the parasitized Swiss mice showed increasing antisaliva antibodies after a third
infestation. The antibodies present in the serum of Swiss mice recognized, through
Western Blot, molecules of the gland extract and the saliva of the tick, the latter
represented by two bands, which indicates that the saliva has few immunogenic
proteins. Our work showed that mice are good hosts for the A. sculptum tick, which
can be used for up to three infestations without developing effective immunity against
the parasitism.
Assunto
Parasitologia, Ixodidae, Infestações por Carrapato, Camundongos, Imunidade
Palavras-chave
Carrapato-estrela, Hematofagia, Infestações, Camundongos, Imunidade