Inibição da Na+/K+ATPase pelo derivado esteróide auabaína: Implicações sobre o ciclo de vesículas sinápticas em junção neuromuscular.

Página do item simplificado
dc.creatorErnani Aloysio Amaral
dc.date.accessioned2019-08-11T15:04:24Z
dc.date.accessioned2025-09-09T00:35:41Z
dc.date.available2019-08-11T15:04:24Z
dc.date.issued2006-07-20
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/1843/ISJS-773KHZ
dc.languagePortuguês
dc.publisherUniversidade Federal de Minas Gerais
dc.rightsAcesso Aberto
dc.subjectJunção neuromuscular
dc.subjectSinapse
dc.subjectBiologia celular
dc.subject.otherVesícula Sináptica
dc.subject.otherEsteróide Auabaína
dc.titleInibição da Na+/K+ATPase pelo derivado esteróide auabaína: Implicações sobre o ciclo de vesículas sinápticas em junção neuromuscular.
dc.typeDissertação de mestrado
local.contributor.advisor1Cristina Guatimosim Fonseca
local.contributor.referee1Marcus Vinicius Gomez
local.contributor.referee1Conceicao Ribeiro da Silva Machado
local.description.resumoOuabaína é um derivado esteróide cardiotônico e inibidor específico da Na+K+-ATPase. Neste trabalho, os efeitos da ouabaína sobre o ciclo de vesículas sinápticas na junção neuromuscular de rã foram investigados de forma direta e dinâmica utilizando-se a sonda fluorescente FM1-43. Este marcador consiste em uma molécula anfipática com uma cauda hidrofóbica que promove a ligação da sonda à membrana do terminal axonal. Após um estímulo despolarizante, a membrana marcada com FM1-43 é internalizada por endocitose compensatória de modo que os pools vesiculares podem ser visualizados por meio de microscopia de fluorescência sob a forma de pontos fluorescentes. Estimulação adicional na ausência de FM1-43 permite acompanhar e mensurar a exocitose. Assim, a ouabaína foi utilizada para investigação dos efeitos do glicosídeo sobre a captação e liberação de FM1-43 durante o ciclo de vesículas sinápticas. Ouabaína levou a uma redução dose-dependente da fluorescência dos pools vesiculares contendo FM1-43. Este efeito foi dependente da presença de Na+ no meio, mas independente do Ca2+ extracelular. Aplicação simultânea de ouabaína e FM1-43 não resultou em marcação apreciável de terminais motores. Pré-incubação com ouabaína, antes da estimulação elétrica, inibiu a captação de FM1-43, mesmo após lavagem prolongada da preparação. Os resultados obtidos indicam que a ouabaína promove liberação vesicular, mas inibe endocitose. Aplicação de NH4Cl, substância que faz o tamponamento de íons H+, não reverteu os efeitos da ouabaína sobre a captação de FM1-43 sugerindo que a inibição da endocitose não se deve a um efeito de acidificação do terminal pré-sináptico. A exocitose evocada pela ouabaína é dependente dos níveis de sódio no meio, mas independente da presença de cálcio extracelular, sugerindo que a liberação vesicular induzida pela ouabaína seja possivelmente mediada pelo recrutamento de estoques intracelulares de cálcio. Os achados apresentados neste trabalho podem futuramente nortear abordagens celulares e moleculares que esclareçam como as alterações iônicas desencadeadas pela ouabaína interferem com a maquinaria protéica que regula o tráfego de vesículas sinápticas.
local.publisher.initialsUFMG

Arquivos

Pacote original

Agora exibindo 1 - 1 de 1
Imagem de Miniatura
Nome:
disserta__o_ernani.pdf
Tamanho:
710.12 KB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Baixar

Coleções

Pós-Graduação em Biologia Celular - Dissertações

Logo UFMG