Comparison between flow cytometry and standard pcr in the evaluation of mrd in children with acute lymphoblastic leukemia treated with the gbtli lla - 2009 protocol

Abstract

O monitoramento da doença residual mínima (DRM) é de importância prognóstica na leucemia linfoblástica aguda (LLA) infantil. A detecção de rearranjos gênicos de imunoglobulinas e receptores de células T por PCR quantitativo em tempo real (RT-PCR) é considerado o padrão ouro para esta avaliação. No entanto, métodos mais acessíveis também apresentam desempenho satisfatório. Este estudo teve como objetivo comparar a análise de DRM por citometria de fluxo (FC) de quatro cores e PCR padrão qualitativo nos dias 35 e 78 de quimioterapia e correlacionar esses dados com as características clínicas dos pacientes. Quarenta e duas crianças com diagnóstico recente de LLA, internadas em um hospital público no Brasil para tratamento de acordo com o Grupo Cooperativo da Infância Brasileira para Tratamento de LLA (GBTLI LLA-2009), foram incluídas. Amostras de medula óssea coletadas no diagnóstico e nos dias 35 e 78 de tratamento foram analisadas para caracterização imunofenotípica de blastos por CF e para detecção de rearranjos clonais por PCR padrão. Análises pareadas foram realizadas em 61/68 (89,7%) amostras de seguimento, com concordância geral de 88,5%. As discordâncias foram resolvidas por RT-PCR, que evidenciou um resultado falso-negativo e quatro falso-positivos na CF, além de dois resultados falso-negativos na PCR. Entre os fatores prognósticos, foi encontrada associação significativa apenas entre linhagem de células T e DRM por PCR padrão. Esses resultados mostram que a CF e a PCR padrão produzem resultados semelhantes na detecção por DRM de LLA infantil e que ambas as metodologias podem ser úteis no monitoramento do tratamento da doença, principalmente em regiões com recursos financeiros limitados.