Detection of benzimidazole resistance-associated single-nucleotide polymorphisms in the beta-tubulin gene in Trichuris trichiura from Brazilian populations

Abstract

A quimioterapia preventiva é recomendada pela OMS como a principal estratégia para o controle de infecções causadas por nematoides em humanos, visando eliminar a morbidade associada a essas infecções. Essa estratégia consiste na administração periódica rotineira de benzimidazóis, entre outros fármacos. Embora esses fármacos diminuam a intensidade das infecções, eles têm o potencial de exercer pressão de seleção para genótipos portadores de mutações associadas à resistência aos fármacos, o que pode resultar no estabelecimento de populações de vermes resistentes. Há evidências na literatura de resistência a esses fármacos em nematoides que infectam humanos, incluindo a espécie Trichuris trichiura. Polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) no gene da beta-tubulina localizados nos códons 167, 198 e 200 estão associados ao mecanismo de resistência aos benzimidazóis em nematoides. Aqui, padronizamos uma técnica molecular baseada em um sistema de mutação refratária à amplificação - reação em cadeia da polimerase (ARMS-PCR) para analisar os códons 167, 198 e 200 de T. trichiura. A metodologia ARMS-PCR foi estabelecida com sucesso para avaliar os códons de interesse. Um total de 420 amostras de ovos individuais foram analisadas de populações obtidas em cinco estados brasileiros. Uma mutação no códon 198 foi observada com uma frequência de 4,8% (20/420), enquanto para os outros dois códons, nenhum polimorfismo foi observado. Este é o primeiro relato da presença desta mutação em populações de T. trichiura no Brasil. Este fato e o surgimento do problema já observado em outras espécies reforçam a necessidade de monitoramento regular de SNPs relacionados à resistência ao benzimidazol usando técnicas altamente sensíveis e específicas.