Flow cytometric-based protocols for assessing anti-mt-2 igg1 reactivity: high-dimensional data handling to define predictors for clinical follow-up of human t-cell leukemia virus type-1 infection

Abstract

O presente trabalho fornece uma abordagem metodológica inovadora para avaliar a reatividade anti-HTLV-1 IgG1 com aplicação prática em laboratório clínico. Soro de controles saudáveis ​​não infectados (NI) e pacientes infectados pelo HTLV-1, categorizados como assintomáticos (AS), com progressão putativa para mielopatia associada ao HTLV-1/paraparesia espástica tropical - HAM/TSP (pHAM) ou com diagnóstico clínico de HAM /TSP (HT) foram ensaiados em duas plataformas de citometria de fluxo paralelas, denominadas: Protocolos Fix e Fix&Perm. A análise das características operacionais indicou que um único par de atributos ("diluição/cut-off do soro") para os protocolos Fix e Fix&Perm apresentou excelente desempenho para o diagnóstico da infecção pelo HTLV-1. Por outro lado, os protocolos Fix e Fix&Perm apresentaram desempenho geral fraco/moderado quando aplicados com propósitos de prognóstico de infecção por HTLV-1. Um instantâneo panorâmico fornecido pelas placas de reatividade revelou claramente a maior sensibilidade do protocolo Fix&Perm para detectar soropositividade para HT, sugerindo que critérios combinatórios passo a passo melhorariam o desempenho global do uso de um único par de atributos. Três estratégias de mineração de dados foram testadas, incluindo análise de título de endpoint, montagem de mapa de calor e análise de árvore de decisão. A análise do mapa de calor bidimensional demonstrou que, enquanto o perfil de agrupamento de NI vs HTLV-1+ revelou segregação em polos opostos, AS vs HT apresentou segregação discreta, mas ainda exibindo um padrão de distribuição entrelaçado. A combinação de métodos para segregar AS do HT apresentou uma acurácia global moderada, porém superior (85,7%; LOOCV=71,4%). A análise abrangente dos dados sustenta que a combinação de métodos melhorou o desempenho para o diagnóstico diferencial de EA e TH, com associação direta com registros laboratoriais, incluindo níveis séricos de citocinas e carga proviral.