Avaliação da proteína Prohibitina de Leishmania infantum como biomarcador para o diagnóstico sorológico das leishmanioses
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Dissertação de mestrado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Ana Paula Morais Martins de Almeida
Matheus Fernandes Costa Silva
Matheus Fernandes Costa Silva
Resumo
As leishmanioses são doenças de alta morbidade e mortalidade, endêmicas no Brasil, causadas por parasitos do gênero Leishmania. Os testes sorológicos atuais dessas doenças são limitados no que se refere à sua sensibilidade e/ou especificidade. Um teste de diagnóstico sorológico padrão ouro para leishmaniose deve ser focado em marcadores que apresentam uma resposta humoral específica em hospedeiros infectados com boa sensibilidade, especificidade, baixo custo e rapidez. Um estudo imunoproteômico recente, utilizando Leishmania infantum, foi realizado com soro de cães com leishmaniose visceral assintomática e sintomática (LVC) e proteínas antigênicas do parasito foram identificadas. A Prohibitina foi identificada em extratos de amastigotas-like e reconhecida pelos soros de cães com LV. No presente estudo, a Prohibitina foi avaliada em sua forma recombinante, além de ter seu epítopo conformacional de linfócitos B da proteína sintetizado (Peptídeo) e também avaliado como biomarcador diagnóstico. O extrato solúvel (SLA) de L. infantum para LV e L. braziliensis para LT foram utilizados como antígenos comparativos. Para o diagnóstico de LVC foram utilizados soros de cães LV assintomática ou sintomática; soros de cães saudáveis de áreas endêmicas ou não endêmicas de leishmaniose; soros de cães saudáveis vacinados com Leish-Tec® e soros de animais infectados experimentalmente com Trypanosoma cruzi ou Ehrlichia canis. Para o diagnóstico de LT, foram utilizados soros de pacientes com leishmaniose cutânea ou mucocutânea; soros de indivíduos saudáveis que vivem em uma área endêmica de leishmaniose, como controles e; soros de indivíduos com doença de Chagas. Os experimentos ELISA foram realizados com a proteína recombinante Prohibitina (rProhibitina) e seu peptídeo sintético (Peptídeo), que apresentaram alta sensibilidade e especificidade para ambas as formas da doença, com
melhor potencial de diagnóstico em comparação com o antígeno comparativo SLA. Dessa forma, a proteína recombinante Prohibitina e seu peptídeo sintético podem ser considerados como candidatos potenciais para a melhoria do diagnóstico sorológico da
LVC e LT.
Abstract
Assunto
Leishmania, Testes Sorológicos, Proteínas Recombinantes, Imunidade Humoral, Biomarcadores, Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
Palavras-chave
Leishmaniose Tegumentar, peptídeo sintético, diagnóstico, Leishmaniose Visceral Canina, proteína recombinante