Perfil de virulência de Candida spp. isoladas de sistema de tratamento de dejetos da pecuária leiteira com biodigestor anaeróbio
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Tese de doutorado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Carlos Henrique Rosa
Susana Johann
Rachel Basques Caligiorne
Adriana Oliveira Medeiros
Susana Johann
Rachel Basques Caligiorne
Adriana Oliveira Medeiros
Resumo
O aproveitamento dos resíduos gerados pela agropecuária é consideravelmente
elevado, dada a relevância desse setor, principalmente no Brasil, e os problemas
acarretados quando ocorre seu descarte incorreto. Para estabelecer o risco clínico da
utilização do biofertilizante, estudos envolvendo leveduras como potenciais patógenos
são necessários, com isso, este trabalho propõe estabelecer o potencial risco clínico
veterinário e humano de Candida spp. isoladas do processo de biodigestão anaeróbia
de dejetos da bovinocultura leiteira. Foram realizadas 10 coletas do afluente, efluente
do biodigestor e da lagoa de biofertilizante da fazenda experimental da EMBRAPA
Gado de Leite. As amostras coletadas foram inoculadas no meio de cultivo seletivo e
diferencial CHROmagar Candida acrescido do corante rosa de bengala. Foi feita a
contagem direta de colônias para a quantificação, isolamento, identificação presuntiva
e cálculo da eficiência do sistema quanto a remoção de Candida spp. Análises de pH,
demanda bioquímica de oxigênio (DBO) e carbono orgânico total (COT) também
foram realizadas. O sistema removeu cerca 2,28 ciclos log de Candida spp. no inverno
e 1,68 ciclos log no verão, contudo, a eficiência do sistema na remoção da matéria
orgânica (DBO e COT) no verão foi maior (84,9% e 84,8%, respectivamente) que no
inverno (71,9% e 56,8%, respectivamente), mostrando que a temperatura influenciou
beneficamente na remoção desse gênero, mas não na qualidade do efluente. A
eficiência total do sistema quanto a remoção de Candida spp. foi de 99,42% no inverno
e de 98,44% no verão. Em relação ao pH, tanto no afluente quanto no efluente e
biofertilizante, em ambas as estações do ano, girou em torno da neutralidade (7,1 –
7,4). Foram isoladas 376 cepas de Candida spp., sendo 177 no verão e 199 no
inverno. No inverno as espécies de Candida identificadas foram C. glabrata (35%), C.
krusei (27%), C. albicans (26%) e C. tropicalis (9%). No verão, as espécies
encontradas foram C. tropicalis (36%), C. albicans (25%), C. krusei (21%) e C. glabrata
(12%). As espécies identificadas são de interesse clinico veterinário por serem as mais
comumente isoladas de leite proveniente de vacas com mastite, ou seja, apresentam
elevado potencial de contaminação para o rebanho. As amostras isoladas foram
estocadas por congelamento e após reativação 216 estavam viáveis. Estas foram
avaliadas quanto ao potencial de dimorfismo e perfil de fingerprint da região (GTG)5.
Então 38 cepas foram testadas quanto a virulência. Todos os isolados produziram
biofilme, 52,6% produziram fosfolipase e apenas três isolados foram produtores de
protease. Com relação ao perfil de susceptibilidade, todas as cepas foram resistentes
ou dose-dependes a anfotericina B e ao itraconazol. Com relação ao fluconazol, as
cepas de C. albicans foram em sua totalidade resistentes, C. tropicalis em 85,7% e C.
glabrata 22,2%. A patogenicidade in vivo, utilizando o modelo invertebrado
Caenorhabditis elegans, mostrou que em C. albicans, C. krusei e C. glabrata a LT50
correlacionou com a habilidade de produzir biofilme, já em C. tropicalis todos os
isolados tiveram a LT50 inferior a linhagem ATCC. Além disso, para C. glabrata, a
LT50 está relacionada às características da cepas produzirem hifas e pseudohifas,
fato esse inusitado e que merece estudos mais aprofundados, assim como os demais
isolados que tiveram suas características de virulência semelhante ou mais forte que
as cepas padrões.
Abstract
Assunto
Microbiologia, Candida, Virulência, Digestores de biogás
Palavras-chave
Biodigestor, Candida, Dejetos bovinos leiteiros, Virulência