Estudo de doze sorovares de Bacillus thuringiensis: curva de crescimento, determinação da presença de genes CRY 4 A/B e variabilidade genômica
Carregando...
Arquivos
Data
Autor(es)
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
Descrição
Tipo
Dissertação de mestrado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Marcelo Carvalho de Resende
Vasco Ariston de Carvalho Azevedo
Vasco Ariston de Carvalho Azevedo
Resumo
Entre as bactérias do gênero Bacillus algumas espécies destacam-se como controladores biológicos microbianos de insetos vetores e pragas, dentre estas destaca-se o Bacillus thuringiensis, bactéria de solo, aeróbia e gram-positiva. Suas características tóxico/específicas para larvas de inseto, a sua inocuidade para o homem e outros mamíferos vertebrados, bem como fauna e flora, estão relacionadas com endotoxina, corpo paraesporal protético intracitoplasmático, denominado ä-endotoxina, produzido durante a fase de esporulação das bactérias. No presente estudo, avaliou-se a atividade larvicida de 12 sorovares de Bacillus thuringiensis, KYU, BRA, OSW, NIG, TOU, KUR, THO, MOR, CAN, DAR, OST e ISR contra tres espécies de mosquitos: Aedes aegypti, Aedes fluviatilis & Culex quinquefasciatus, bem como foram realizadas curvas de crescimento dos referidos sorovares com o intuito de observar o comportamento das bactérias. Também foram realizados PCR com iniciadores específicos para determinação da presença de genes Cry4A/B de Bti e variabilidade genômica observadas por AP-PCR. Os resultados da atividade larvicida mostraram diferenças significativas para as tres espécies de mosquitos estudadas. As larvas de Aedes aegypti foram susceptíveis a somente ao controle positivo, entretanto as larvas de Aedes fluviatilis apresentaram taxas de mortalidade para os sorovares KUR, KYU enquanto que, as larvas de Culex quinquefasciatus foram 100% sensíveis ao sorovar DAR. Nas curvas de crescimento os sorovares apresentam comportamento semelhante, iniciando a esporulação em 32 horas de crescimento, exceto para o MOR, que iniciou sua esporulação em 24 horas de crescimento. O tempo de crescimento para estas bactérias ficou estimado em 0,50 hora e a velocidade de crescimento foi de 1,381 horas-1 A técnica de PCR para amplificação dos genes cry4A/B mostrou um produto já esperado de 439bp para o sorovar ISR. A reação de AP-PCR apresentou produtos (RAPD), que foram equacionados utilizando-se a fórmula de DICE (1945), para estabelecer coeficientes de similaridade entre referidos sorovares. Através de fenograma, pode-se concluir um percentual de similaridade entre os bacilos partindo da linha de fenon. Os sorovares de maior coeficiente de similaridade foram NIG e KYU aproximadamente 92% de similaridade. Enquanto que, os sorovares MOR e o KUR apresentaram-se isolados no fenograma. ISR aparece mais próximo do sorovar OST e as duas variedades nacionais BRA e OSW mostram um coeficiente de similaridade em torno de 65%.
Abstract
Assunto
Microbiologia, Bacillus (Bacteria) Genetica, Bacillus thuringiensis
Palavras-chave
Microbiologia