Identificação genotípica de staphylococcus aureus multiresistentes a drogas isolados de animais de produção

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Artigo de periódico

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Genotypic identification of multiresistant Staphylococcus aureus isolates from the production animals

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Resumo

Métodos genotípicos asseguram a identificação dos micro-organismos ao nível de espécie. O gene femA (Factor Essential for Methicillin resistance) tem sido utilizado como marcador espécie específico para Staphylococcus aureus resistentes ou não a meticilina. O presente trabalho teve como objetivo verificar o uso do gene femA como ferramenta para a confirmação da espécie Staphylococcus aureusdentre os isolados de animais de produção. Para tal, amostras coletadas da superfície de tetos e de leite bovino foram utilizadas para isolamento, seleção e identificação de micro-organismos por métodos microbiológicos padrão. Isolados previamente identificados como S. aureus e resistentes a oxacilina foram submetidos à extração de DNA genômico de acordo com recomendações do fabricante do kit KAPA Extract. Os DNAs foram quantificados e posteriormente submetidos à reação em cadeia de polimerase (PCR) para detecção do gene femA. Os amplicons foram visualizados em gel de agarose a 1,5% e fotodocumentados. Todos os isolados presuntivamente identificados por métodos padrão microbiológicos (14/14) e cepa S. aureus ATCC 25923 (controle positivo) amplificaram um fragmento de 132 pares de bases correspondente ao gene parcial femA. A presença do gene femA em todos os isolados verificados pela analise molecular confirmou a identificação presuntiva microbiológica dos isolados como S. aureus

Abstract

Identification of microorganisms at the species level is ensured by genotypic methods analyses. The femA gene (Factor Essential for Methicillin resistance) has been used as marker specie specific of Sta-phylococcus aureus, independently if it is methicillin-resistant or not. This study aimed to verify the use of femA gene as a tool for confirmation of the Staphylococcus aureus species in production animals. Samples harvested from the ceiling surface e of cattle’s milk were used for isolation, selection and identification of microorganisms by microbiological standard methods. All isolates previously identified as S. aureus and resistant to oxacillin were submitted to genomic DNA extraction according to the KAPA Ex-tract kit manufacturer’s recommendations. The DNAs were quantified and then submitted to Polimerase Chain reaction (PCR) to detection of the femA gene. The amplicons were visualized on 1.5% agarose gel and photodocumented. All isolates presumptively identified by microbiological standard methods (14/14) and S. aureus strain ATCC 25923 (positive control) amplified a fragment of 132 base pairs cor-responding to the partial femA gene. The presence of the femA gene in all isolates by molecular analysis confirmed the microbiological method presumptive identification as S. aureus.

Assunto

Antibióticos, Moleculas, Genética molecular

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https://periodicos.ufmg.br/index.php/ccaufmg/issue/view/126

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