Avaliação das vacinas Leish-111f® + MPL-SE®, Leish-85 + MPL-SE® e vacina de extrato bruto contra infecção dessafio em câes (Canis familiaris) por Leishmania (Viannia) braziliensis
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Editor
Universidade Federal de Minas Gerais
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Tipo
Dissertação de mestrado
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Primeiro orientador
Membros da banca
Joao Carlos Franca da Silva
Ricardo Nascimento Araujo
Ricardo Nascimento Araujo
Resumo
Neste estudo, foram avaliados a imunogenicidade e eficácia de vacinas compostas por antígenos recombinantes fusionados isolados de Leishmania (TSA, LeIF e LmSTI1) ou por antígeno bruto de promastigotas de Leishmania guyanensis (MHOM/BR/1973/M1176), contra leishmaniose tegumentar. Quarenta cães sem raça definida foram subdivididos em 5 grupos vacinais (8 animais por grupo), sendo um grupo imunizado com Leish-111f® e MPL-SE® como adjuvante, um grupo imunizado com Leish-85 (TSA e LmSTI1 fusionados) e MPL-SE® como adjuvante e um grupo imunizado com antígenos bruto de Leishmania guyanensis e MPL-SE®. Os outros dois grupos foram utilizados como controles do adjuvante e placebo. Todos os animais receberam 3 doses de vacinas em intervalos de 21 dias e foram desafiados por injeção com 106 promastigotas infectantes de L. braziliensis. A avaliação parasitológica foi realizada verificando o aparecimento da lesão cutânea no local de inoculação das formas promastigotas. A avaliação da resposta imune humoral foi realizada por ELISA utilizando antígeno bruto de L. braziliensis e antígeno recombinante Leish-111f® e foi realizada antes da vacinação (Dia 0), após as três doses da vacina (Dia 63) e após o desafio (Dia 84, Dia 120 e Dia 150). Foram pesquisados anticorpos da classe IgG e subclasses IgG1 e IgG2. A avaliação da resposta imune celular foi realizada pela imunofenotipagem de leucócitos do sangue periférico, pelo ensaio de proliferação linfocitária, dosagem de citocinas como IFN-, IL-4 e IL-10 e dosagem de óxido nítrico, em coletas de sangue realizadas antes da vacinação (Dia 0), após a imunização (Dia 63) e após o desafio (Dia 150). Foi realizado hemograma e avaliação bioquímica antes e após o estudo para verificar um possível efeito adverso da vacinação. Após o término do período de avaliação todos os animais foram sacrificados. Foi demonstrado uma produção específica de anticorpos frente aos antígenos vacinais com diferença significativa (p<0,05) entre os diversos grupos imunizados e os grupos controles. Entretanto, não foram observadas diferenças significativas na avaliação da resposta celular observada, seja na imunofenotipagem, dosagem de citocinas ou óxido nítrico. Após o desafio, 6 cães do grupo placebo desenvolveram lesão no local da inoculação, enquanto que no grupo vacinado com Leish-111f®+MPL-SE® somente 1 animal apresentou lesão. Dos animais imunizados com Leish-85+MPL-SE® ou com antígeno bruto+MPL-SE®, dois animais de cada grupo desenvolveram lesão.
Abstract
Assunto
Parasitologia, Leish-111f, Leishmaniose cutânea, Leishmaniose cutânea Vacinas
Palavras-chave
VACINA, Leishmania (Viannia) braziliensis