Evaluation of three recombinant proteins for the development of ELISA and immunochromatographic tests for visceral leishmaniasis serodiagnosis

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Artigo de periódico

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Avaliação de três proteínas recombinantes para o desenvolvimento de testes ELISA e imunocromatográficos para o sorodiagnóstico da leishmaniose visceral

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Resumo

CONTEXTO: A leishmaniose visceral (LV) é uma doença infecciosa que representa uma importante causa de morte em crianças menores de 1 ano e idosos no Brasil. O sorodiagnóstico é um pilar dos programas de eliminação da LV; no entanto, apresenta limitações significativas devido à sua baixa acurácia. OBJETIVO: Este estudo teve como objetivo avaliar três proteínas recombinantes de Leishmania infantum (rFc, rC9 e rA2) selecionadas a partir de análises proteômicas e genômicas anteriores para desenvolver ensaios imunoenzimáticos (ELISA) e testes imunocromatográficos (ICT) para o sorodiagnóstico da leishmaniose visceral humana (LVH) e da leishmaniose visceral canina (LVC). MÉTODOS: Um total de 186 amostras de soro humano (70 sintomáticas infectadas por L. infantum , 20 infectadas por outras doenças e 96 saudáveis) e 185 amostras de soro canino (82 sintomáticas infectadas por L. infantum , 27 assintomáticas infectadas por L. infantum e 76 saudáveis) foram utilizadas para a detecção de anticorpos. RESULTADOS: Das três proteínas, rA2 (91,5% de sensibilidade e 87% de especificidade) e rC9 (95,7% de sensibilidade e 87,5% de especificidade) apresentaram o melhor desempenho nos testes ELISA-HVL e ELISA-CVL, respectivamente. O ICT-rA2 também apresentou o melhor desempenho para o diagnóstico de HVL (92,3% de sensibilidade e 88,0% de especificidade) e teve alta concordância com os testes de imunofluorescência indireta (IFI), ELISA-rK39, IT-LEISH® e ELISA EXT . Os testes ICT-rFc, ICT-rC9 e ICT-rA2 apresentaram sensibilidades de 88,6%, 86,5% e 87,0%, respectivamente, com valores de especificidade de 84,0%, 92,0% e 100%, respectivamente, para o diagnóstico de CVL. PRINCIPAIS CONCLUSÕES: Os três antígenos selecionados por nós são candidatos promissores para o diagnóstico da leishmaniose visceral, independentemente do formato do teste, embora as combinações de antígenos e os parâmetros do teste possam exigir otimização adicional.

Abstract

BACKGROUND: Visceral Leishmaniasis (VL) is an infectious disease that is a significant cause of death among infants aged under 1 year and the elderly in Brazil. Serodiagnosis is a mainstay of VL elimination programs; however, it has significant limitations due to low accuracy. OBJECTIVE : This study aimed to evaluate three recombinant Leishmania infantum proteins (rFc, rC9, and rA2) selected from previous proteomics and genomics analyses to develop enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunochromatographic tests (ICT) for the serodiagnosis of human VL (HVL) and canine VL (CVL). METHODS: A total of 186 human (70 L. infantum-infected symptomatic, 20 other disease-infected, and 96 healthy) and 185 canine (82 L. infantum-infected symptomatic, 27 L. infantum-infected asymptomatic, and 76 healthy) sera samples were used for antibody detection. FINDINGS: Of the three proteins, rA2 (91.5% sensitivity and 87% specificity) and rC9 (95.7% sensitivity and 87.5% specificity) displayed the best performance in ELISA-HVL and ELISA-CVL, respectively. ICT-rA2 also displayed the best performance for HVL diagnosis (92.3% sensitivity and 88.0% specificity) and had high concordance with immunofluorescence antibody tests (IFAT), ELISA-rK39, IT-LEISH®, and ELISAEXT. ICT-rFc, ICT-rC9, and ICT-rA2 had sensitivities of 88.6%, 86.5%, and 87.0%, respectively, with specificity values of 84.0%, 92.0%, and 100%, respectively for CVL diagnosis. MAIN CONCLUSIONS: The three antigens selected by us are promising candidates for VL diagnosis regardless of the test format, although the antigen combinations and test parameters may warrant further optimisation.

Assunto

Proteínas recombinantes, Leishmaniose visceral, Testes sorológicos, Diagnóstico, Leishmania infantum

Palavras-chave

Visceral leishmaniasis, Recombinant proteins, Diagnosis, ELISA, Immunochromatographic test

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https://www.scielo.br/j/mioc/a/h3My4KRCtWQftQZsxbCZnwN/?lang=en

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