The role of hemocytes during arbovirus infection in Aedes aegypti mosquitoes

Abstract

Vírus transmitidos por mosquitos, como os da Dengue e da Zika, continuam sendo grandes ameaças à saúde global, com sua expansão acelerada pelas mudanças climáticas. Embora se saiba que os hemócitos mediam respostas imunológicas antibacterianas e antiparasitárias em mosquitos, seu papel durante infecções virais é menos compreendido. Neste estudo, foi investigada a contribuição dos hemócitos fagocíticos de Aedes aegypti durante a infecção pelo vírus Zika (ZIKV). A depleção química de hemócitos fagocíticos por meio de lipossomos contendo clodronato reduziu a replicação viral nos intestinos médios em 4 e 8 dias após a alimentação (dpf) e de forma sistêmica em 8 dpf. Resultados semelhantes foram obtidos após a inoculação direta do vírus na hemolinfa, indicando que os hemócitos podem servir como locais de replicação viral. A análise transcriptômica de célula única revelou 140 genes enriquecidos em hemócitos em diferentes tecidos, com funções associadas à sinalização do fator de crescimento epidérmico e às interações com a matriz extracelular, destacando papéis em reparo tecidual. Treze genes foram especificamente enriquecidos em hemócitos associados ao intestino médio, incluindo duas integrinas, cujo silenciamento apresentou uma tendência não significativa à redução da infecção sistêmica. O silenciamento do gene da família Nimrod AAEL000636 diminuiu a replicação viral em 4 dpf, implicando-o nas interações iniciais entre hemócitos e o intestino médio. Por fim, a caracterização de promotores identificou uma região regulatória de um receptor scavenger Classe C capaz de dirigir a expressão de dsRed especificamente em hemócitos fagocíticos, fornecendo o primeiro marcador genético específico de hemócitos em Aedes aegypti. Em conjunto, esses resultados demonstram que os hemócitos fagocíticos facilitam a disseminação do ZIKV e podem atuar como nichos de replicação viral, além de fornecer novas ferramentas genéticas para estudos direcionados da biologia dos hemócitos de mosquitos.