Dengue diagnostics: serious inaccuracies are likely to occur if pre-analytical conditions are not strictly followed

Abstract

JUSTIFICATIVA: A natureza termolábil do vírus da dengue (DENV) em amostras de soro deve ser considerada ao aplicar testes de diagnóstico de rotina para evitar problemas que possam afetar a precisão dos resultados do teste com implicações diretas para o gerenciamento de casos e notificação da doença. OBJETIVOS: Verificar se variáveis ​​pré-analíticas, como tempo de armazenamento e temperatura, interferem na acurácia dos principais testes diagnósticos de rotina para dengue. MÉTODOS: O isolamento viral, a reação em cadeia da polimerase em tempo real com transcrição reversa (RT PCR) e o ensaio imunoenzimático (ELISA) de NS1 foram avaliados em 84 amostras submetidas a diferentes condições pré-analíticas. DADOS: A sensibilidade e o valor preditivo negativo foram diretamente afetados pelas condições de armazenamento das amostras. RT-PCR e isolamento do vírus mostraram maior dependência de amostras bem conservadas para um diagnóstico preciso. Curiosamente, mesmo o armazenamento a -30ºC por um tempo relativamente curto (15 dias) não foi adequado para resultados precisos usando isolamento viral e testes de RT-PCR. Por outro lado, o NS1 ELISA não apresentou redução significativa da positividade para as alíquotas testadas nas mesmas condições dos testes anteriores. CONCLUSÕES PRINCIPAIS: Nossos resultados apóiam a estabilidade do marcador NS1 no diagnóstico ELISA e indicam que a precisão de testes de rotina, como isolamento viral e RT-PCR, é significativamente afetada por condições inadequadas de transporte e armazenamento de amostras de soro.