Caracterização de kefir de leite e impacto do seu consumo em modelo murino de infecção por Salmonella Typhimurium
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Tese de doutorado
Título alternativo
Primeiro orientador
Membros da banca
Alinne Pereira de Castro
Bruna Cristina dos Santos Cruz
José Miguel Ortega
Mariana de Moura e Dias
Tiago Antonio de Oliveira Mendes
Bruna Cristina dos Santos Cruz
José Miguel Ortega
Mariana de Moura e Dias
Tiago Antonio de Oliveira Mendes
Resumo
RESUMO
Devido à problemática global da resistência antimicrobiana em bactérias, e a falta de
sucesso e investimento em pesquisas que procuram novos antibióticos, são necessárias
novas alternativas eficazes para reduzir infecções bacterianas. A Organização Mundial
da Saúde, alerta que doenças transmitidas por alimentos contaminados (DTA 's) matam
420 mil pessoas no mundo por ano e uma em cada dez pessoas no mundo adoecem
após sua ingestão. Entre as DTA ́s, as bactérias do gênero Salmonella são a segunda
maior causadora de infecções no Brasil. Uma possível solução é o uso de
probióticos, que são alimentos com microrganismos viáveis capazes de conferir
benefícios à saúde, quando administrados em dose pré-estabelecida. O Kefir, um
probiótico originário do Cáucaso e Península Balcânica, é um alimento fermentado,
em leite ou água, cuja fermentação, alcoólica e láctica, é conduzida pelos grãos de
Kefir ou por fermento de Kefir. Este produto possui atividades antimicrobiana, antiinflamatória e antioxidante; auxilia no tratamento de síndrome do intestino inflamado e
doenças diarréicas. Neste trabalho foi realizada a caracterização microbiologica e
físico-quimica de uma bebida láctea fermentada por kefir produzida em condições
domésticas (25°C ± 2°C por 24 horas, sem agitação em aerobiose), bem como seu
consumo por camundongos C57BL/6 e qual a relação com o eixo intestino-cérebro.
Esse eixo descreve a participação de ambos órgãos em uma comunicação contínua e
bidirecional. Novas tecnologias permitiram demonstrar que o estímulo digestivo pode
ativar regiões do cérebro, assim como sintomas psicológicos podem causar transtornos
na função gastrointestinal. Além disso, foi avaliado o efeito do consumo de Kefir neste
modelo murino anterior ao desafio com Salmonella enterica subs. enterica
Typhimurium. Todos os experimentos foram acompanhados de análise metagenômica
para caracterização da comunidade bacteriana sob as condições avaliadas. A
abundância relativa foi calculada e inicialmente, foi observado que animais tratados
com Kefir tiveram maior abundância relativa de bactérias da família Lachnospiraceae e
do gênero Lachnoclostridium, e menor abundância relativa de enterobactérias, como
Helicobacter e Shigella/E.coli. Alguns benefícios previamente associados com o uso de
kefir foram também encontrados, como aumento na produção de butirato e aumento de
atividade de enzimas que participam do processo anti-oxidativo. Porém, diante da
infecção, os animais alimentados com Kefir apresentaram maior mortalidade do que os
animais tratados com água (grupo controle), associados a efeito inflamatórios (houve aumento de IFN-ɤ e diminuição de IL-10) que comprometeram o controle da infecção,
levando a falta de resposta imune, permitindo que Salmonella typhimurium causasse
uma infecção grave. Desta forma, o uso indiscriminado de probióticos, especialmente
em casos de infecções, devem ser utilizados com cautela, pois também podem estar
associados a efeitos tóxicos ou indesejados.
Abstract
ABSTRACT
Due to the global problem of antimicrobial resistance in bacteria, and the lack of
success and investment in research looking for new antibiotics, new effective
alternatives are needed to reduce bacterial infections. The World Health Organization
warns that diseases transmitted by contaminated food (Foodborne diseases) kill
420,000 people worldwide per year and one in ten people in the world become ill after
ingestion. Among Foodborne diseases, bacteria of the genus Salmonella are the
second major cause of infections in Brazil. A possible solution is the use of probiotics,
which are foods with viable microorganisms capable of conferring health benefits
when administered in predetermined doses. Kefir, a probiotic originating in the
Caucasus and the Balkan Peninsula, is a fermented food, in milk or water, whose
alcoholic and lactic fermentation is carried out by kefir grains or kefir yeast. This
product has antimicrobial, anti-inflammatory and antioxidant activities; assists in the
treatment of inflamed bowel syndrome and diarrheal diseases. In this work, the
microbiological and physical-chemical characterization of a kefir-fermented milk
drink produced in domestic conditions was carried out (25°C ± 2°C for 24 h, without
agitation in an aerobic environment), as well as its consumption by C57BL/6 mice and
the relationship with the intestine-brain axis. This axis describes the participation of
both organs in continuous and bidirectional communication. New technologies made
possible to demonstrate that digestive stimulation can activate regions of the brain,
just as psychological symptoms can cause disturbances in gastrointestinal function.
Furthermore, the effect of Kefir consumption in this murine model before the
challenge with Salmonella enterica subs. enterica Typhimurium. All experiments
were accompanied by metagenomic analysis to characterize the bacterial community
under the evaluated conditions. The relative abundance was calculated and, initially, it
was observed that animals treated with Kefir had a higher relative abundance of
bacteria from the Lachnospiraceae family and the genus Lachnoclostridium, and a
lower relative abundance of enterobacteria such as Helicobacter and Shigella/E.coli.
Some benefits previously associated with the use of kefir were also found, such as an
increase in the production of butyrate and an increase in the activity of enzymes that
participate in the anti-oxidative process. However, given the infection, animals fed
with Kefir showed higher mortality than animals treated with water (control group),
associated with inflammatory effects (there was an increase in IFN-ɤ and a decrease in
IL-10) that compromised the infection control, leading to a lack of immune response, allowing Salmonella typhimurium to cause a severe infection. Thus, the
indiscriminate use of probiotics, especially in cases of infections, should be used with
caution, as they may also be associated with toxic or unwanted effects.
Assunto
Bioinformática, Kefir, Metagenômica, Salmonella typhimurium, Probióticos
Palavras-chave
Kefir, Metataxonômica, Metagenômica, Salmonella Typhimurium, Probiótico, Microbiota fecal, Diversidade bacteriana
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