Staphylococcus aureus protection-related type 3 cell-mediated immune response elicited by recombinant proteins and GM-CSF DNA vaccine
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Universidade Federal de Minas Gerais
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Resumo
Staphylococcus aureus mastitis remains a major challenge for dairy farming. Here, 24 mice were immunized and divided into four groups: G1: control; G2: Granulocyte Macrophage Colony-Stimulating Factor (GM-CSF) DNA vaccine; G3: F0F1 ATP synthase subunit α (SAS), succinyl-diaminopimelate (SDD), and cysteinyl-tRNA synthetase (CTS) recombinant proteins; and G4: SAS+SDD+CTS plus GM-CSF DNA vaccine. The lymphocyte subpopulations, and the intracellular interleukin-17A (IL-17A) and interferon-γ production in the draining lymph node cells were immunophenotyped by flow cytometry. The immunophenotyping and lymphocyte proliferation was determined in spleen cells cultured with and without S. aureus stimulus. Immunization with S. aureus recombinant proteins generated memory cells in draining lymph nodes. Immunization with the three recombinant proteins plus GM-CSF DNA led to an increase in the percentage of IL-17A+ cells among overall CD44+ (memory), T CD4+, CD4+ T CD44+ CD27−, γδ TCR, γδ TCR+ CD44+ CD27+, and TCRVγ4+ cells. Vaccination with S. aureus recombinant proteins associated with GM-CSF DNA vaccine downregulated TH2 immunity. Immunization with the three recombinant proteins plus the GM-CSF DNA led to a proliferation of overall memory T, CD4+, and CD4+ TEM cells upon S. aureus stimulus. This approach fostered type 3 immunity, suggesting the development of a protective immune response against S. aureus.
Abstract
A mastite por Staphylococcus aureus continua sendo um grande desafio para a pecuária leiteira. Aqui, 24 camundongos foram imunizados e divididos em quatro grupos: G1: controle; G2: vacina de DNA do fator estimulante de colônias de granulócitos e macrófagos (GM-CSF); G3: F0F1 ATP sintase subunidade α (SAS), succinil-diaminopimelato (SDD) e cisteinil-tRNA sintetase (CTS) proteínas recombinantes; e G4: vacina SAS+SDD+CTS mais GM-CSF DNA. As subpopulações de linfócitos e a produção intracelular de interleucina-17A (IL-17A) e interferon-γ nas células do linfonodo drenante foram imunofenotipadas por citometria de fluxo. A imunofenotipagem e a proliferação linfocitária foram determinadas em células de baço cultivadas com e sem estímulo de S. aureus. A imunização com proteínas recombinantes de S. aureus gerou células de memória em linfonodos drenantes. A imunização com as três proteínas recombinantes mais o DNA de GM-CSF levou a um aumento na porcentagem de células IL-17A+ entre as células CD44+ (memória) gerais, T CD4+, CD4+ T CD44+ CD27−, γδ TCR, γδ TCR+ CD44+ CD27+ e TCRVγ4+ . A vacinação com proteínas recombinantes de S. aureus associadas à vacina de DNA de GM-CSF reduziu a imunidade de TH2. A imunização com as três proteínas recombinantes mais o DNA de GM-CSF levou a uma proliferação de células T, CD4+ e CD4+ TEM de memória geral após estímulo de S. aureus. Essa abordagem promoveu imunidade tipo 3, sugerindo o desenvolvimento de uma resposta imune protetora contra S. aureus.
Assunto
Vacinas, Imunização, Proteínas recombinantes, Staphylococcus aureus, Mastite bovina
Palavras-chave
Vaccine, Staphylococcus aureus, T cell response, Mastitis, Bovine
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