Uso de Peptídeo Sintético selecionado por Phage Display para o Imunodiagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina

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Universidade Federal de Minas Gerais

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Dissertação de mestrado

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Membros da banca

Tomaz Aroldo da Mota Santos
Oscar Bruna Romero

Resumo

Neste trabalho foram selecionados três antígenos através da técnica de Phage Display para o imunodiagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina. Estes antígenos tiveram os DNAs extraídos e seqüenciados. O clone que apresentou a maior reatividade frente ao pool de soros de cães com leishmaniose visceral foi sintetizado através da síntese química em membrana de celulose e na sua forma solúvel, purificado e sua massa confirmada através de espectrometria de massa. Este peptídeo (TTDDDKLKKTLTYRS) foi avaliado em ensaios de ELISA do tipo indireto e em ensaios de Spot frente a soros de cães positivos e normais para leishmaniose visceral canina. Não se detectou reatividade imunoenzimática dos soros avaliados frente a este peptídeo sintético. Outros dois peptídeos selecionados também foram sintetizados em membranas de celulose e avaliados. Estes peptídeos foram capazes de serem reconhecidos apenas por soros de animais positivos para leishmaniose visceral. A possibilidade de estes peptídeos serem usados em ensaios de ELISA como kits de diagnóstico para leishmaniose visceral canina será verificada após a síntese solúvel destes.

Abstract

Assunto

Imunologia, Biologia molecular, Leishmaniose visceral, Células clonais, Clonagem molecular, Peptideos, Expressão gênica, Ensaio de imunoadsorção enzimática, Análise de sequência de DNA

Palavras-chave

Farmacologia Bioquímica e Molecular

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